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本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的AMOZ，在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原。

樣本處理前須知

處理任何樣本時(shí)，都必須注意：

（a）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。

（b）實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

樣本前處理需配制：

1．衍生化試劑稱15.1 mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10 mL溶解(濃度10 mM)

2．C液：（供奶樣用）稱12.5 g亞硝基鐵氰化鉀用去離子水定溶至100 mL。

D液：（供奶樣用）稱29.8 g 硫酸鋅用去離子水溶解定溶至100 mL。

3．0.1 M K₂HPO₄稱22.8 g K₂HPO₄·3H₂O

加去離子水溶解定溶至1 L

4．1M HCl取8.6 ml濃HCl加水定溶至100 mL。

5．1M NaOH稱取4 g NaOH加水定溶至100 mL。

操作說明：

1．將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出，置室溫（20-25 ℃）平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2．按需要取出微孔條及板架，將不用的微孔板重新密封，保存于2-8 ℃，不要冷凍。

3．加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 μL /孔，然后加入抗體工作液50 μL/孔，再振蕩混勻，用封板膜蓋板，室溫反應(yīng)30 min。

4．洗板4-5次，每次浸泡30 s，拍干。

5．加入酶標(biāo)記物100 μL/孔，用封板膜蓋板，室溫反應(yīng)20 min。

6．洗板4-5次，每次浸泡30 s，拍干。

7．顯色：每孔加入底物緩沖液50μl，再加底物液50μl，輕輕振蕩混勻，室溫環(huán)境下避光顯色10min。

8．測(cè)定：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（在20min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定吸光度值。

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