CHB患者HBsAg特異性B細(xì)胞可能預(yù)測干擾素治療效果

慢性乙型肝炎病毒感染(CHB)患者的治療指南目前兩類抗病毒藥物：核苷(酸)類似物和干擾素。與核苷(酸)類似物相比，干擾素具有更高的HBsAg和HBeAg清除率，但其治療依從性、副作用可能阻礙臨床應(yīng)用。因此，確定可靠的預(yù)測生物標(biāo)志物以實(shí)現(xiàn)大化效益至關(guān)重要。

在HBV感染中，乙肝表面抗原(HBsAg)特異性B細(xì)胞的損傷和恢復(fù)與HBsAg血清學(xué)轉(zhuǎn)化相關(guān)。然而，目前對HBsAg特異性B細(xì)胞免疫的認(rèn)識(shí)有限，并且沒有特異性和敏感性的方法來檢測HBsAg特異性B細(xì)胞。

2023年歐洲肝臟研究協(xié)學(xué)(EASL)年會(huì)-國際肝臟大會(huì)(ILC 2023)將于2023年6月21-25日在奧地利維也納舉行。南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院吳超教授/李婕教授團(tuán)隊(duì)發(fā)表于會(huì)上的一項(xiàng)研究，提出了一種單細(xì)胞水平檢測HBsAg特異性B細(xì)胞的方法[采用優(yōu)化的ELISPOT(酶聯(lián)免疫斑點(diǎn))方法]。這種方法可以探索不同階段的HBsAg特異性B細(xì)胞的反應(yīng)，以及這些反應(yīng)對CHB患者干擾素治療效果的影響。肝膽相照平臺(tái)特邀李婕教授進(jìn)行分享。

研究方法

本研究納入142例不同免疫階段的CHB患者，其中90例為初治(慢性肝炎期HBeAg陽性21例，慢性肝炎期HBeAg陰性5例，慢性感染期HBeAg陽性9例，慢性感染期HBeAg陰性55例)。52例患者為既往經(jīng)治患者。

在5天的時(shí)間內(nèi)刺激外周血淋巴細(xì)胞，使用ELISPOT監(jiān)測外周血HBsAg特異性B細(xì)胞的頻率。分析血清HBsAg水平與外周血HBsAg特異性B細(xì)胞的相關(guān)性，初步觀察干擾素治療前后HBsAg特異性B細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。

研究結(jié)果

在慢性肝炎期，6例(28.6%)HBeAg陽性患者的ELISPOT檢測結(jié)果呈陽性，表明存在外周血HBsAg特異性B細(xì)胞，而慢性肝炎期HBeAg陰性患者ELISPOT檢測無人呈陽性(0%)。

慢性感染期的患者中，3例(30%)HBeAg陽性和14例(25.5%)HBeAg陰性患者ELISPOT顯示陽性結(jié)果。

HBeAg陽性慢性肝炎組外周血HBsAg特異性B細(xì)胞數(shù)量高于HBeAg陰性慢性肝炎組(p<0.05)。

干擾素治療后，ELISPOT陽性組“功能治”比例高于基線ELISPOT陰性組(陽性組為50%，陰性組為17.2%，P<0.05)。

干擾素治療后，10例(52.6%)患者HBsAg特異性B細(xì)胞增加，4例(21.1%)患者實(shí)現(xiàn)“功能性治”。同時(shí)，4例(21.1%)HBsAg特異性B細(xì)胞減少的患者和5例(26.3%)HBsAg特異性B細(xì)胞沒有變化的患者未實(shí)現(xiàn)“功能性治”。

研究結(jié)論

在不同免疫狀態(tài)的CHB患者中，外周血中含有不同比例的HBsAg特異性B細(xì)胞。干擾素治療前外周血中是否存在HBsAg特異性B細(xì)胞可能是預(yù)測干擾素治療效果的重要免疫學(xué)指標(biāo)。

研究者說 李婕教授

干擾素是臨床指南的慢性乙型病毒性肝炎的抗病毒治療藥物，是乙肝臨床治的重要用藥，但由于它療效有限，而且在使用過程中患者還要克服注射給藥的不便和藥物不良反應(yīng)，因此，確定可靠的療效預(yù)測生物標(biāo)志物顯得尤為重要。

乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 消失伴或不伴血清轉(zhuǎn)化為乙型肝炎表面抗體 (HBsAb) 被認(rèn)為是慢性乙型肝炎 (CHB) 的一種功能性治和抗病毒治療的理想終點(diǎn)。越來越多的研究表明，除先天免疫系統(tǒng)和病毒特異性T細(xì)胞外，B細(xì)胞在防御HBV方面也發(fā)揮作用。HBsAg特異性B細(xì)胞是體內(nèi)HBsAb抗體的來源，因此對其功能的研究應(yīng)引起足夠的重視。

本研究采用優(yōu)化的ELISPOT（酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)）方法對接受干擾素治療患者治療前基線外周血中HBsAg特異性B細(xì)胞進(jìn)行檢測。該方法能夠準(zhǔn)確的評估患者治療前B細(xì)胞HBsAb分泌功能，可以準(zhǔn)確反映患者抗病毒體液免疫的強(qiáng)度。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)治療前ELISPOT陽性組患者實(shí)現(xiàn)“功能治”的比例高于基線ELISPOT陰性狀態(tài)患者。該結(jié)果提示，有效的B細(xì)胞參與是清除HBV的必要條件。B細(xì)胞反應(yīng)的缺陷可能是導(dǎo)致治療失敗的原因之一。

因此，上述研究提示干擾素治療前外周血中是否存在HBsAg特異性B細(xì)胞可能是預(yù)測干擾素治療效果的重要免疫學(xué)指標(biāo)，其潛在機(jī)制也值得進(jìn)一步探究。