艾通立對(duì)急性缺血性心肌損傷大鼠血液流變學(xué)異常的干預(yù)

　   作者：王鋼 作者單位：廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院老年科，廣東廣州市　510010

　　【摘要】 　　目的：探討重組組織型纖溶酶原激活劑(recom binant tissue plasminogen activator ，rt -P A )艾通立(Actil2yse )對(duì)急性缺血性心肌損傷(AIMI)大鼠血液流變學(xué)異常的干預(yù)作用。方法：異丙腎上腺素腹腔注射誘導(dǎo)SD 大鼠發(fā)生AIMI。設(shè)AIMI 組、AIMI+艾通立腹腔注射組及正常對(duì)照組，檢測(cè)三組大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)及血漿內(nèi)皮素(E T )濃度。結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，AIMI 組各項(xiàng)血液流變學(xué)指標(biāo)及血漿E T 濃度均顯著增高( P < 0101 );而艾通立腹腔注射可部分逆轉(zhuǎn)上述改變(P < 0101 )，且各項(xiàng)血液流變學(xué)指標(biāo)與血漿E T 濃度之間呈顯著相關(guān)(r=-015 ，0198 ，P < 0101 )。結(jié)論：艾通立作為rt-P A 類(lèi)藥物，可通過(guò)對(duì)急性缺血性心肌損傷局部血流變學(xué)異常的干預(yù)，以減輕心肌急性缺血性損傷的程度。

　　【關(guān)鍵詞】 艾通立,組織型纖溶酶原激活劑,心肌缺血,血液流變學(xué)

　　Abstract：ob[x]jective ：To investigate the effects of actilyse on hemorheology in rats with acute ischemic myocardiaI in2 jure (AIMI).M ethods ：Indexes of hemorheology and plasma endothelin (E T )were measured in normal rats ，AIMIrats(induced by isopropylarterenol)and AIMI rats treated by actilyse .Results ：Co m pared to normalcontrol，indexesof hemorheology and plasma E H all significantly increased one day after AIMI (P < 0101 ).These changes were sig2nificantly reversed to some extent with the treatment of actilyse (P < 0101 ).Plasma E T correlated with indexes of he2

　　morheology significantly(r=-015 ， +0198 ，P < 0101 ).Conclusion ：As a reco m binant tissue plasminogen activator(rt2P A )，actilyse can alleviate the extent of myocardialischemic injure by reversing the abnormality in hemorheology .

　　Key words ：Actilyse ;Tissue plasminogen activator (t -P A );M yocardialischemic ;H emorheology

　　近年研究發(fā)現(xiàn)，急性心肌梗塞(A MI )不僅在冠脈內(nèi)形成血栓引起急性冠脈供血不足，而且有體內(nèi)血液流變學(xué)異常，引起冠脈血流減慢及血管舒縮活性物質(zhì)釋放異常，加重心肌急性缺血性損傷[1 ， 5 ]。

　　重組組織型纖溶酶原激活劑(rt -P A ) 通過(guò)促進(jìn)血栓的纖溶，來(lái)實(shí)現(xiàn)冠脈再通，但其對(duì)急性缺血性心肌損傷(acute ischemic m yocardial injure ，AIMI )機(jī)體血液流變學(xué)影響的研究尚少。本研究旨在觀(guān)察rt -P A 類(lèi)藥物艾通立對(duì)AIMI 大鼠血液流變學(xué)及血液中內(nèi)皮素(E T ) 濃度的影響， 以初步探討rt -P A 對(duì)AIMI 機(jī)體內(nèi)血液流變學(xué)異常的干預(yù)作用。

　　1 　材料與方法

　　1.1 一般資料

　　111.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：普通清潔級(jí)老齡雄性SD 大鼠24只，鼠齡18 ， 24 月，體重380 ， 600g 。適應(yīng)性飼養(yǎng)2 周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

　　111.2 主要試劑及儀器： 艾通立(注射rt -P A ，Actilyse ，50 m g/支)系德國(guó)勃林格殷格翰國(guó)際公司產(chǎn)品(進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)：X970469 )，臨用時(shí)以注射用水配成1 m g/ml 濃度。E T 放免試劑盒由解放軍總醫(yī)院東亞免疫技術(shù)研究所提供，以S N -697 全自動(dòng)雙探頭放射免疫γ 計(jì)數(shù)器(上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠(chǎng))進(jìn)行放免計(jì)數(shù)。心肌酶以全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。血液流變學(xué)指數(shù)以全自動(dòng)血液粘度儀進(jìn)行測(cè)定。

　　1.2 方法

　　1.2.1 AIMI 大鼠的制備及實(shí)驗(yàn)分組： 參照文獻(xiàn)[6 ]，鹽酸異丙腎上腺素以5 m g/kg 腹腔注射SD 大鼠誘導(dǎo)AIMI 。24 只老齡SD 大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(腹腔注射等量生理鹽水;8 只)，急性心肌損傷組(8 只)，艾通立干預(yù)組(8 只，于異丙腎上腺素腹腔注射后1 h ， 再次以4 m g/kg 艾通立腹腔注射)三組間大鼠體重、鼠齡均無(wú)顯著性差異。

　　1.2.2 心肌酶、血液流變學(xué)及血漿E T 濃度測(cè)定：于急性心肌損傷或艾通立腹腔注射后24h ，迅速對(duì)三組大鼠頸動(dòng)脈插管取血。其中，部分血樣置入肝素鈉抗凝試管;進(jìn)行血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè);部分血樣行心肌酶測(cè)定。余下血樣則與10 %oE D T A 二鈉(30μl/2 ml)和抑肽酶(40μl/2 ml 血) 混勻，3 000r/min 于4 ℃離心10 min ，分離血漿。按試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)血漿E T 濃度進(jìn)行測(cè)定。

　　1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

　　統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS 1010 軟件進(jìn)行。所有計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(珚x ±s)表示，用A N O V A(單因素方差分析) 對(duì)各組均數(shù)差異進(jìn)行顯著性分析，然后用S N K (q 檢驗(yàn))對(duì)任意兩組均數(shù)的差異進(jìn)行顯著性分析，各血液流變學(xué)指標(biāo)與血漿E T 濃度之間進(jìn)行直線(xiàn)相關(guān)性分析。P < 0105 為差異有顯著性。

　　2 結(jié)　果

　　2.1 AIMI 及艾通立干預(yù)后心肌酶的變化

　　AIMI 組心肌酶C K 、A ST 及L D H 均顯著高于正常對(duì)照組(P < 0101 );而艾通立干預(yù)組心肌酶均顯著低于A(yíng)IMI 組( P < 0101 )， 其中C K 與L D H與正常對(duì)照無(wú)顯著性差異(表1 )。

　　2.2 　AIMI 及艾通立干預(yù)后血液流變學(xué)的變化

　　如表2 所示，與正常對(duì)照相比：AIMI 組血液流變學(xué)指標(biāo)中全血粘度、毛細(xì)管血漿粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)及紅細(xì)胞電泳指數(shù)均顯著增高(P < 0101 )而紅細(xì)胞變形指數(shù)顯著降低( P< 0101 )。艾通立干預(yù)組中全血粘度(低、中、高切)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)及紅細(xì)胞電泳指數(shù)均顯著低于A(yíng)IMI 組(P < 0101 );而紅細(xì)胞變形指數(shù)顯著高于A(yíng)IMI 組(P < 0101 )。艾通立干預(yù)組中除紅細(xì)胞變形指數(shù)與正常對(duì)照組有顯著性差異外(P < 0101 )，余血液流變學(xué)指標(biāo)與正常對(duì)照無(wú)顯著差異(P > 0105 )

　　2.3 AIMI 及艾通立干預(yù)后血漿E T 濃度的變化

　　與正常對(duì)照相比：AIMI 組血漿E T 濃度顯著增加(P < 0101 );而艾通立干預(yù)組血漿E T 濃度則顯著低于A(yíng)IMI 組( P < 0101 )、高于正常對(duì)照組( P< 0101 )，見(jiàn)表3 。

　　2.4 急性心肌損傷艾通立干預(yù)后血漿E T 濃度與血液流變學(xué)的相關(guān)性分析

　　AIMI 艾通立干預(yù)后，血漿E T 濃度分別與全血粘度(低切)(r=0194 )、全血粘度(中切)(r=0195 )、全血粘度(高切)(r=0184 )、毛細(xì)管血漿粘度(r =0189 )、全血還原粘度(中切) (r =0197 )、全血還原粘度(中切)(r=0197 )、全血還原粘度(高切)(r=0198 )、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(0196 )、紅細(xì)胞剛性指數(shù)(r=0196 )、紅細(xì)胞電泳指數(shù)(r=0198 ) 均顯著正相關(guān)(P 值均< 0101 )，而與紅細(xì)胞變形指數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0150 ， P <0105 )。

　　3 討　論

　　近年來(lái)研究表明，AIMI 如心肌梗塞機(jī)體內(nèi)血液流變學(xué)會(huì)發(fā)生異常[1 ]，引起冠脈血流減慢，后者可造成局部冠脈內(nèi)皮及心肌細(xì)胞的缺血、缺氧性損傷，使冠脈舒縮活性物質(zhì)合成、釋放異常，誘發(fā)冠脈的攣縮，進(jìn)而加重冠脈循環(huán)的障礙[2 ， 5 ]。藥物溶栓在急性心肌梗塞(A MI )的冠脈再通治療策略中占據(jù)主導(dǎo)地位;它尚有非溶栓藥理作用，如降低血中纖維蛋白原引起的紅細(xì)胞聚集、促進(jìn)纖維蛋白降解產(chǎn)物引起的紅細(xì)胞解集， 抑制血小板的血管粘附[7 ， 9 ]等機(jī)制，從而改善局部冠脈血流、減輕AI2MI 。作為溶栓藥物，rt -P A 對(duì)AIMI 局部冠脈血液流變學(xué)及某些冠脈收縮物質(zhì)如E T 的異常是否有干預(yù)作用，目前研究尚少。

　　本研究結(jié)果顯示，AIMI 大鼠體內(nèi)全血粘度、毛細(xì)管血漿粘度、紅細(xì)胞聚集及剛性指數(shù)均高于正常，而紅細(xì)胞變形指數(shù)下降，從而導(dǎo)致血液趨于高粘、高聚、高滯狀態(tài)，引起局部冠脈血流減慢。而予以艾通立干預(yù)后，全血粘度降低、紅細(xì)胞聚集性和剛性指數(shù)均顯著下降，紅細(xì)胞變形指數(shù)則升高;提示艾通立可部分逆轉(zhuǎn)AIMI 體內(nèi)血液流變學(xué)異常。

　　此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，艾通立可使AIMI 老齡大鼠的血漿E T 濃度顯著降低; 后者與血液流變學(xué)多數(shù)指標(biāo)的改善呈良好的相關(guān)性;提示兩者之間存在著某種因果關(guān)聯(lián)。由于目前尚缺乏足夠的研究證據(jù)表明，纖溶酶原激活劑可直接作用并影響冠脈內(nèi)皮細(xì)

　　胞及心肌細(xì)胞內(nèi)E T 的合成與釋放，故推測(cè)艾通立可能通過(guò)AIMI 局部冠脈的血栓溶解和血液流變學(xué)改善，使局部冠脈內(nèi)皮及心肌細(xì)胞缺血、缺氧的狀況得以改善;進(jìn)而減少二者因缺血、缺氧性損傷引起的E T 合成、釋放。總之，本研究提示，rt -P A類(lèi)藥物艾通立可能通過(guò)干預(yù)AIMI 局部冠脈的血液流變學(xué)異常，以減輕心肌缺血性損傷的程度。