臨床檢驗(yàn)儀器----臨床微生物儀器

         微生物(microorganism，簡(jiǎn)稱(chēng)microbe)，是包括細(xì)菌、病毒、真菌以及一些小型的原生動(dòng) 物、顯微藻類(lèi)等在內(nèi)的一大婁生物群體。是一切肉跟看不見(jiàn)或看不清的微小生物．通常要用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚。涵蓋了有益有害的眾多種類(lèi)，廣泛涉及健康、食-鋪、 醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等諸多領(lǐng)域。臨床上常見(jiàn)的微生物儀器主要有：全自動(dòng)血培養(yǎng)儀、微生物鑒定、藥敏分析系統(tǒng)和厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)。

         一、全自動(dòng)血培養(yǎng)儀 血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)主要用于檢驗(yàn)臨床血液標(biāo)本中有無(wú)病原微生物存在，對(duì)于菌血癥、敗血
癥等循環(huán)系統(tǒng)感染的診斷具有十分重要的意義。

         （一）基本結(jié)構(gòu) 因儀器的種類(lèi)不同，結(jié)構(gòu)也不完全一樣，但一般血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)均由主機(jī)、培養(yǎng)瓶、真空 采血器、計(jì)算機(jī)及外圍設(shè)備組成。

         1．主機(jī)主機(jī)設(shè)有恒溫孵育系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)。恒溫孵育系統(tǒng)有恒溫裝置和振蕩培養(yǎng) 裝置，培養(yǎng)瓶的支架根據(jù)容量不同分為50瓶、120瓶、240瓶等，在樣品進(jìn)行恒溫培養(yǎng)的同時(shí) 不斷地進(jìn)行檢測(cè)分析。檢測(cè)系統(tǒng)有的設(shè)在每個(gè)培養(yǎng)瓶支架的底部，有的設(shè)在每個(gè)培養(yǎng)瓶支架的側(cè)面，有的僅有一個(gè)檢測(cè)器，自動(dòng)傳送系統(tǒng)按順序?qū)⒚總€(gè)培養(yǎng)瓶送到檢測(cè)器所在的位置進(jìn)行栓測(cè)分析。

         2.培養(yǎng)瓶根據(jù)培養(yǎng)要求不同，有需氧培養(yǎng)瓶、厭氧培養(yǎng)瓶、小兒專(zhuān)用培養(yǎng)瓶、結(jié)核菌培養(yǎng)瓶、高滲培養(yǎng)瓶、中和抗生素培養(yǎng)瓶。不同培養(yǎng)要求，培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的成分也不同，主要有： 培養(yǎng)基、抗菌藥物拈抗劑。

         3.真空采血器配有一次性使用的無(wú)菌塑料管，兩端與兩個(gè)無(wú)菌針頭相連，操作時(shí)將一端的針頭進(jìn)行靜脈穿刺，另一端的針頭插入負(fù)壓的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，所采集的血液因負(fù)壓作用直 接進(jìn)入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

         4．?dāng)?shù)據(jù)管理系統(tǒng)血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)均配有計(jì)算機(jī)，提供數(shù)據(jù)管理功能。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng) 是血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)不可分割的一部分，用來(lái)判斷并發(fā)出陰陽(yáng)性結(jié)果報(bào)告。通過(guò)條碼識(shí)別樣 品編號(hào)，記錄和打印檢測(cè)結(jié)果．進(jìn)行數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)和分析等。

         （二）檢測(cè)原理 血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)有：應(yīng)用測(cè)壓原理的m培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)、應(yīng)用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)、應(yīng)用均質(zhì)熒光衰減原理的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)、檢測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓的山培 養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)。原理如下：
         1．應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的變化來(lái)判斷培養(yǎng)瓶?jī)?nèi) 是否有微生物的生長(zhǎng)。當(dāng)微生物生長(zhǎng)時(shí)，分解利用培養(yǎng)基中的不同營(yíng)養(yǎng)成分，或產(chǎn)生氣體或 消耗氣體，如O2、CO2、H2.、N2等，導(dǎo)致培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力改變。血培養(yǎng)瓶配有一次性連接器，研以插入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)．連接器的另一端接壓力感受器。隨著微生物產(chǎn)生或消耗氣體的變化，壓力 感受儀器將壓力的變化轉(zhuǎn)換為電壓而傳人|卜算機(jī)，并以時(shí)問(wèn)為橫坐標(biāo)顯示曲線(xiàn)。因此該曲 線(xiàn)則隨微生物消耗或產(chǎn)生氣體量的多少呈現(xiàn)上升或下降表現(xiàn)，血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)壓原理， 如同8－26所示。

         2.應(yīng)州光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)，是應(yīng)用 廣泛的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)。其基本原理是各種微生物在 代謝過(guò)程中必然會(huì)產(chǎn)生終末代謝產(chǎn)物二氧化碳，導(dǎo)致培養(yǎng) 基的pH及氧化還原電勢(shì)的改變，利用光電比色檢測(cè)血培 養(yǎng)瓶中CO2,，就可判斷培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)有無(wú)病原微生物生長(zhǎng)。

         3．應(yīng)用均質(zhì)熒光衰減原理的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用 均質(zhì)熒光衰減原理的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)，是在液體培養(yǎng)基 內(nèi)，加入含有能發(fā)熒光的物質(zhì)分子。在孵育過(guò)程中，如有病原微生物生長(zhǎng)，其代酣過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生H-（使培養(yǎng)基變酸）、產(chǎn)生電子（使培養(yǎng)基中某些物質(zhì)還原）和（或）各種帶 電荷的原子團(tuán)（如在液體培養(yǎng)基內(nèi)CO2變成HCO3－），發(fā)熒光的物質(zhì)分子在受到這些因素的影響后，改變自身結(jié)構(gòu) 而轉(zhuǎn)變成不發(fā)熒光的化合物。因此，用一個(gè)獨(dú)特的光學(xué)系 統(tǒng)，可以檢測(cè)每個(gè)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)發(fā)出的熒光，只要出現(xiàn)熒光衰減的現(xiàn)象，即提示有微生物生長(zhǎng)。

         4.檢測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)檢
         測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓的血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)，在血培養(yǎng)基中加入一定的電解質(zhì)而使血培養(yǎng)基 具有一定的導(dǎo)電性能。微生物在代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生質(zhì)子、電子、各種帶電荷的原予囝（如在 液體培養(yǎng)基巾CO2變成HCO3－），通過(guò)電極檢測(cè)血培養(yǎng)基的導(dǎo)電性和電壓變化來(lái)判斷培養(yǎng) 基內(nèi)有無(wú)微生物的生長(zhǎng)。

         （三）性能特點(diǎn)
         (l)以連續(xù)恒溫振蕩方式培養(yǎng)，細(xì)菌易于生長(zhǎng)。

         (2)采用封閉式非侵人性的瓶外檢測(cè)方式，避免標(biāo)本的交叉感染，無(wú)放射性污染。

         (3)自動(dòng)連續(xù)檢測(cè)，縮短了檢測(cè)時(shí)間，保證了陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)的快速、準(zhǔn)確。

         (4)陽(yáng)性結(jié)果報(bào)告及時(shí)，并經(jīng)打印顯示或報(bào)警提示，85%必上的陽(yáng)性標(biāo)本均能在48小 時(shí)內(nèi)被檢出。

         (5)培養(yǎng)瓶可在任何時(shí)間放人 血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)，并進(jìn)行追蹤檢查。

         (6)數(shù)據(jù)處理功能強(qiáng)大，數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)隨時(shí)監(jiān)視感應(yīng)器的讀數(shù)，依據(jù)讀數(shù)判定標(biāo)本的陽(yáng)性或陰性，并可進(jìn)行流行病學(xué)的統(tǒng)計(jì)與分析。

         二、微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng) 微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)除臨床標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)外，還包括醫(yī)院感染的檢測(cè)、細(xì)菌 耐藥性的檢測(cè)、流行病學(xué)調(diào)查和新藥研究巾的實(shí)驗(yàn)性工作。由于計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用，大大促 進(jìn)了微生物鑒定的自動(dòng)化進(jìn)程。一些自動(dòng)化程度高、功能齊全的微生物鑒定和藥敏分析系 統(tǒng)相繼出現(xiàn)，并巳用于臨床微生物檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫和商檢系統(tǒng)。功能范圍包括細(xì)菌、厭氧菌和真菌等微生物鑒定以及抗菌藥物敏感試驗(yàn)和低抑菌濃度(MIC)的測(cè)定。在～些系統(tǒng)內(nèi) 還裝有分析軟件，增加了數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析功能，能定期發(fā)出統(tǒng)計(jì)學(xué)報(bào)告，為醫(yī)院感染的控制及流行病學(xué)調(diào)查提供科學(xué)的依據(jù)。

         （一）基本結(jié)構(gòu) 微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)包括測(cè)試卡（板）、菌液接種器、培養(yǎng)與監(jiān)測(cè)系

         1.測(cè)試卡（板）各種微生物自動(dòng)臻定及藥敏分析系統(tǒng)均配有測(cè)試卡或測(cè)試板。測(cè)試 卡（板）是系統(tǒng)的工作基礎(chǔ)，各種不同的測(cè)試卡（板）具有不同的功能?；镜臏y(cè)試卡（板） 包括革蘭陽(yáng)性菌鑒定卡（板）、革蘭陰性菌鑒定卡（板）、革蘭陽(yáng)性菌藥敏試驗(yàn)卡（板）和革蘭陰性菌藥敏試驗(yàn)卡（板）。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)涂片和革蘭染色結(jié)果進(jìn)行選擇。各種測(cè)試卡（板）上都 附有條形碼，上機(jī)前經(jīng)條形碼掃描器掃描后即可被系統(tǒng)識(shí)別，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)給測(cè)試卡（板）編號(hào)，防止標(biāo)本混淆。

         2．菌液接種器可分為真空接種器和活塞接種器兩種。測(cè)試卡的菌液接種一般采用 真空接種器。真空接種器分為上、下兩部分：上部為封口器并有切割作用，下部為真空充液接種裝置。測(cè)試板的菌液接種一般采用活塞接種器。

         3.培養(yǎng)與監(jiān)測(cè)系統(tǒng)測(cè)試卡（板）接種菌液后即可被放人孵育箱／讀數(shù)器中進(jìn)行培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)。監(jiān)測(cè)系統(tǒng)每隔一定時(shí)間對(duì)每孔的透光度或熒光物質(zhì)的變化進(jìn)行一次檢測(cè)?？焖贌晒?測(cè)定系統(tǒng)可直接對(duì)熒光測(cè)試板各孔中產(chǎn)生的熒光進(jìn)行測(cè)定，并將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，輸人數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)．?dāng)?shù)據(jù)管理系統(tǒng)則將這些電信號(hào)轉(zhuǎn)換成數(shù)碼，與原先已經(jīng)儲(chǔ)存的對(duì)照值相比 較，推斷出菌種的類(lèi)型及藥敏結(jié)果，常規(guī)測(cè)試板則直接檢測(cè)電信號(hào)，從干涉濾光片過(guò)濾的光 通過(guò)光導(dǎo)纖維導(dǎo)人測(cè)試板上的各個(gè)測(cè)試孔，光感受二極管測(cè)定通過(guò)每個(gè)測(cè)試孔的光量，產(chǎn)生 相應(yīng)的電信號(hào)，從而推斷出菌種的類(lèi)型及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

         4.數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)就像整個(gè)系統(tǒng)的神經(jīng)中樞，始終保持與孵育箱、讀數(shù) 器、打印機(jī)的聯(lián)絡(luò)，控制孵育箱溫度、自動(dòng)定時(shí)讀數(shù)、負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)換及分析處理。當(dāng)反應(yīng)完 成時(shí)，計(jì)算機(jī)自動(dòng)打印報(bào)告，并可進(jìn)行菌種發(fā)生率、菌種分離率、抗生索耐藥率等流行病學(xué)統(tǒng) 計(jì)。有些還配有專(zhuān)家系統(tǒng)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)的結(jié)果提示何種耐藥機(jī)制的存在，對(duì)藥敏試驗(yàn)的結(jié) 果進(jìn)行“解釋性”判讀。

         （二）基本原理 微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)基本原理包括微生物的鑒定原理和抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的檢測(cè)原理。 1微生物的鑒定原理微生物的鑒定原理采用數(shù)碼鑒定原理。數(shù)碼鑒定的基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對(duì)系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻率總和。 數(shù)據(jù)庫(kù)F}『許多細(xì)菌條目組成。每個(gè)條目代表一個(gè)細(xì)菌菌種或一個(gè)細(xì)菌生物型。有些細(xì)菌只靠生化反應(yīng)無(wú)法將屬內(nèi)細(xì)菌鑒定到種，則條目代表細(xì)菌屬并提出“需用血清學(xué)試驗(yàn)”等進(jìn)行下一步鑒定的指示。每個(gè)條目包括多種單項(xiàng)的生化反應(yīng)。系統(tǒng)中各種細(xì)菌種類(lèi)有各自 相應(yīng)的數(shù)據(jù)庠，可鑒定出不同數(shù)目的細(xì)菌。 編碼即將所得到的細(xì)菌生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式，可把被測(cè)細(xì)菌的全部生化反應(yīng)結(jié)果快速轉(zhuǎn)錄成數(shù)字（編碼），經(jīng)查閱編碼檢索本，計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)又可將數(shù)字轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的 細(xì)菌名稱(chēng)。 查碼有編碼檢索本和計(jì)算機(jī)軟件兩種方式：編碼檢索本內(nèi)查碼和利用計(jì)算機(jī)軟件查碼。 編碼檢索本內(nèi)鴦碼有2種可能性：
         (1)有該數(shù)碼，寫(xiě)有以下信息：①有一個(gè)或幾個(gè)菌名條目及其%id值（鑒定百分率）和T值；②對(duì)鑒定結(jié)果好壞的評(píng)價(jià)有佳、很好、好、可以接受、不可接受等；③用小括號(hào)指出關(guān)鍵的生化結(jié)果，并列出該項(xiàng)反應(yīng)應(yīng)得的陽(yáng)性百分率；④遇到分辨不清或多條菌名排列在一起 時(shí)，指出必須增加補(bǔ)充試驗(yàn)的項(xiàng)目及該反應(yīng)應(yīng)得的陽(yáng)性百分率；⑤指出某些注意要點(diǎn)，需用 “推測(cè)性鑒定”，并將此菌送至參考實(shí)驗(yàn)室，需用“血清學(xué)鑒定”，作進(jìn)一步的證實(shí)等。 
         (2)無(wú)該數(shù)碼，可能有3種原因：①此菌生化譜不典型；②不能接受%id<80. 0；③可 疑，被測(cè)菌某一生化反應(yīng)為陽(yáng)性，而相似菌對(duì)該反應(yīng)的陽(yáng)性百分率為O。如果不是污染，即 保證是純菌的前提下，可與就近的API計(jì)算機(jī)服務(wù)部聯(lián)系，以求進(jìn)一步解決。解釋是將細(xì)菌%id值的大小分別作出可信度評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)結(jié)果為佳、很好、好以及可以接受。

         2．抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的檢測(cè)原理 自動(dòng)化抗菌藥物敏感性試驗(yàn)使用藥敏測(cè)試板（卡）進(jìn)行測(cè)試，其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定小孔中細(xì)菌生長(zhǎng)狀況，得出待檢菌在各藥物濃度的生長(zhǎng)斜率，經(jīng)回歸分析得到低抑菌濃度( MIC)值，并根據(jù)NCCI。S標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度：敏感S(sensitive，S)、中度敏感(middle sensitive，MS)和耐藥( resistance，R)。藥敏測(cè)試板也分為常規(guī)測(cè)試板和快速熒光測(cè)試板2種。常規(guī)測(cè)試 板的檢測(cè)原理為比濁法，快速熒光測(cè)試板的檢測(cè)原理為熒光法。

         （三）性能特點(diǎn)
         1．自動(dòng)化程度高可聯(lián)機(jī)孵育、定時(shí)掃描、自動(dòng)加樣、讀數(shù)、分析，打印報(bào)告等，節(jié)省人 力并減少人為差錯(cuò)和誤差。

         2．功能范嗣大檢測(cè)微生物的范圍包括需氧菌、厭氧菌、真菌等鑒定及細(xì)菌藥物敏感 試驗(yàn)、低抑菌濃度測(cè)定。

         3.檢測(cè)速度快快速熒光測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為2-4小時(shí)，絕大多數(shù)細(xì)菌的鑒定可在4-6小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果，常規(guī)測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為18小時(shí)左右。

         4．結(jié)果準(zhǔn)確鑒定微生物種類(lèi)廣泛系統(tǒng)具有較大的細(xì)菌資料庫(kù)，鑒定細(xì)菌種類(lèi)可達(dá) 700余種，可進(jìn)行數(shù)十甚至上百種不同抗生索的敏感性測(cè)試。

         5．避免誤差使用一次性測(cè)試卡或測(cè)試板可避免由于洗刷不潔而造成人為誤差。

         6．設(shè)置可供使用者調(diào)節(jié)的可變程序。

         三、厭氧培養(yǎng)系統(tǒng) 厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)是用于檢測(cè)厭氧菌感染的一種儀器。厭氧菌感染（除梭狀芽孢桿菌屬 的細(xì)菌外）多是內(nèi)源性感染，如菌血癥、敗血癥和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、口腔、呼吸系統(tǒng)、腹部、泌尿生殖系統(tǒng)等多部位的感染。這類(lèi)細(xì)菌因常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)檢查為陰性，必須用特殊的厭氧培養(yǎng)方法才能分離出來(lái)，因而厭氧培養(yǎng)裝置的改進(jìn)和發(fā)展與厭氧藺分離陽(yáng)性率有著密切關(guān)系。 厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)用于臨床樣品中厭氧性細(xì)菌的分離培養(yǎng)，因此要求培養(yǎng)過(guò)程中完全無(wú)氧。 該系統(tǒng)包括樣品采集、運(yùn)送、接種和培養(yǎng)4個(gè)環(huán)節(jié)。在臨床樣品采集、運(yùn)送及樣品接種過(guò)程中骶限度的接觸空氣，使用新鮮預(yù)還原培養(yǎng)基以及培養(yǎng)裝置內(nèi)可靠的厭氧狀態(tài)是分離厭 氧茼的基本保障。 常見(jiàn)的厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)包括厭氧手套箱、多功能微生物培養(yǎng)箱、厭氧罐、厭氧袋及其他小型厭氧培養(yǎng)裝置。 
         （一）厭氧手套箱
         1基本結(jié)構(gòu)厭氧手套箱由箱體和箱架組成，箱體左側(cè)為密閉操作室(1000mm×600mm×700mm)，室前面是透明的有機(jī)玻璃面板，面板上兩個(gè)橡皮圈固定乳膠手套，操作 者通過(guò)密封的乳膠手套進(jìn)行操作。密閉室內(nèi)有一小型恒溫培養(yǎng)箱，細(xì)菌接種完畢不接觸空氣，直接放入箱中進(jìn)行培養(yǎng)。箱體右側(cè)有外門(mén)與過(guò)道室相通，過(guò)道室是放人培養(yǎng)器材和取出 用過(guò)的物品的緩沖室。過(guò)道室的上方面板上裝有壓力表、指示燈、各種開(kāi)關(guān)、數(shù)字顯示溫度 調(diào)節(jié)儀、流量計(jì)等。箱架后部為真空泵，前面放有2個(gè)鋼瓶，其中一瓶裝有99. 0%純氨氣，另一瓶為80%氮、10%氫氣和10%二氧化碳的混合氣。鋼瓶和真空泵用粗橡皮管與箱內(nèi)各室相通，以便輸氣和抽真空。在空氣通路上裝有細(xì)菌濾膜，以去除氣體中的雜菌。操作室內(nèi) 有紫外線(xiàn)燈，通過(guò)紫外線(xiàn)照射進(jìn)行滅菌。操作室裝有3個(gè)帶孔的塑料扁盒，上層盒裝鈀粒，中間層盒裝變色硅膠，下層盒裝吸人式小型風(fēng)扇，保證操作室內(nèi)的除氧和除濕。接種針、接種環(huán)系電熱絲制成，通電后燒灼滅菌，內(nèi)裝的熔蠟裝置可旋轉(zhuǎn)加熱試管上端及熔化用于封口 的同體石蠟。 
         2．基本原理 (l)操作室厭氧環(huán)境的建立：厭氧手套箱氣路如圖8-27所示。

         當(dāng)腳踏電磁閥門(mén)時(shí)，操作室的氣體被排出；放開(kāi)腳踏閥門(mén)氣路即被關(guān)閉。打開(kāi)氮?dú)?/a>瓶閥和減壓閥，氮?dú)鈿饴烽_(kāi)通，打開(kāi)混合氣大流量閥即進(jìn)入混合氣體。通過(guò)置換氣體3次（第1次和第2次均充以N2，第3次充以80%N2、10%CO2,、10%H2混合氣體），操作箱內(nèi)換氣過(guò)程結(jié)束。然后打開(kāi)吸人式電
         風(fēng)扇，混合氣進(jìn)入鈀粒盒，操作室中的剩余O。和H.，羥鈀催化成水，南變色硅膠吸收。此時(shí) 經(jīng)過(guò)物理的抽氣換氣過(guò)程和化學(xué)除氧過(guò)程，操作室內(nèi)已進(jìn)入無(wú)氧狀態(tài)，屆時(shí)打開(kāi)亞甲藍(lán)安瓿，指示劑亞甲藍(lán)應(yīng)保持無(wú)色。 
         (2)過(guò)道室厭氧狀態(tài)的建立：先關(guān)緊內(nèi)門(mén)，再打開(kāi)外門(mén)，放人所用物體后即關(guān)閉外門(mén)。 開(kāi)啟真空泵抽真空至6. 67kPa，停止抽氣。打開(kāi)N2瓶閥門(mén)，至真空泵指針回復(fù)原位。反復(fù) 置換兩次，后充人混合氣，過(guò)道室已進(jìn)入無(wú)氧狀態(tài)。 (3)厭氧培養(yǎng)操作：打開(kāi)內(nèi)門(mén)，將物件移人操作室，關(guān)緊內(nèi)門(mén)。紫外線(xiàn)燈照射滅菌0. 5小時(shí)后進(jìn)行樣品接種，接種完畢后置人培養(yǎng)箱中。關(guān)閉內(nèi)門(mén)后，才能開(kāi)啟外門(mén)，取出過(guò)道室 內(nèi)的廢棄物品。

         （三）厭氯袋
         1．基本結(jié)構(gòu)厭氧袋是一種透明不透氣的握料袋，南透明不透氣的塑料袋、產(chǎn)氣管、厭氧度指示管、催化劑、吸濕劑管組成。容量小，可放1~3個(gè)培養(yǎng)皿。

         2．基本原理厭氧袋是利用氫硼化鈉與水反應(yīng)產(chǎn)生氫，在催化劑鈀的作用下，氫與袋中氧結(jié)合生成水達(dá)到除氧目的，除氧效果可從袋中厭氧度指示劑觀察。同時(shí)，利用檸檬酸與碳酸氫鈉的作用產(chǎn)生CO2，以有利于需要CO2，的厭氧菌的生長(zhǎng)。

         （四）多功能微生物培養(yǎng)箱
         能提供不同的氣體環(huán)境在不同培養(yǎng)罐中，可分別供需氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌、專(zhuān)性 厭氧菌的分離培養(yǎng)。

         1．基本結(jié)構(gòu)由控溫系統(tǒng)和抽真空系統(tǒng)組成的金屬箱組成?？販叵到y(tǒng)由控溫儀、溫差 繼電器、軸流風(fēng)扇、溫度傳感器、加熱器和溫控選擇盤(pán)等組成。抽真空系統(tǒng)由真空表、真空 泵、輸氣接頭、輸氣閥、減壓閥、電磁閥和培養(yǎng)罐組成。氣罐的輸氣接頭上裝有濾膜以?xún)艋諝狻Ｏ鋬?nèi)有4個(gè)獨(dú)立的細(xì)菌培蕎罐，罐表面有蓋板，與罐體之間裝有密封圈，擰緊蓋板螺帽， 即可密閉培養(yǎng)罐，每罐均有獨(dú)立的電磁閥。箱體輸氣接頭用硬質(zhì)皮管與N：和（X^鋼瓶減壓閥連接。

         2．基本原理當(dāng)已接種樣品培養(yǎng)物和鈀粒、干燥劑、亞甲藍(lán)指示劑放八罐內(nèi)后，關(guān)緊罐門(mén)。啟動(dòng)電磁閥，抽真空達(dá)93. 3kPa后，關(guān)閉真空閥。開(kāi)啟N2輸氣閥，以N2抽換2次，第2次再完成輸入氣體，罐體內(nèi)抽氣、換氣過(guò)程。再附以化學(xué)除氧形成厭氧環(huán)境。通過(guò)溫控選擇盤(pán)選擇所需溫度進(jìn)行孵育。

         （五）小型厭氧培養(yǎng)裝置 由長(zhǎng)方形玻璃培養(yǎng)瓶和瓶邊的側(cè)室組成。前者平面可供細(xì)菌接種，側(cè)室內(nèi)加入化學(xué)藥品制造厭氧環(huán)境。側(cè)室可有一個(gè)或兩個(gè)，也可用試管代替培養(yǎng)瓶，原理同厭氧袋。