假性血小板減少九例原因分析

         近年文獻(xiàn)有關(guān)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板計(jì)數(shù)減少(<50×109/L)而臨床無任何出血傾向、血栓形成等表現(xiàn)的假性血小板減少(ps㈨dothr。mboqto-penh,PTCP)的病例報(bào)道逐漸增多.PTCP是指由于體外不同原因?qū)е碌难“寮傩詼p低,其中抗凝劑乙二胺四乙酸(EDTA)依賴性PTCP(EDTA-PTCP)為常見,其機(jī)制為EDTA誘導(dǎo)血小板膜表面隱蔽抗原暴露或?qū)乖M(jìn)行修飾,導(dǎo)致血漿中預(yù)存的循環(huán)自身抗血小板抗體與之發(fā)生反應(yīng),出現(xiàn)血小板聚集而使自動(dòng)化血細(xì)胞分析儀不能正確計(jì)數(shù),造成血小板假性減低。我院檢驗(yàn)科⒛10年5月-2012年6月共發(fā)現(xiàn)9例EDTA-PTCP,現(xiàn)結(jié)合臨床資料分析相關(guān)因素如下。
 

         1臨床資料
 

         1.1一般資料本組9例,男4例,女5例;年齡11-74歲,平均47歲。行血常規(guī)檢查均發(fā)現(xiàn)血小板減少(<50×109/L)。9例中健康體檢者及門診上呼吸道感染應(yīng)用抗生素及抗病毒藥物后各1例。住院7例,均有抗生素應(yīng)用史,其中3例因不同程度貧血、血小板減少疑診為特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)，后行骨髓象檢查診斷為多發(fā)性骨髓瘤、溶血性貧血、骨折不愈合(大致正常骨髓象)各 1例,且骨髓穿刺血小板檢查正常;余4例分別為糖尿病合并泌尿系感染、高血壓病、膽結(jié)石術(shù)后、宮內(nèi)妊娠,但臨床無任何出血傾向。以上9例均采用更換抗凝劑、手工計(jì)數(shù)、涂血片顯微鏡檢查的方法進(jìn)行復(fù)查。
 

         1.2方法
 

         1.2.1儀器與試劑:BECKMACOULTER-LH750血細(xì)胞分析儀,OLYMPUS-BⅩ41顯微鏡,EDTA-K2真空采血管及枸櫞酸鈉抗凝真空采血管(均由浙江康是醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn))，載玻片(由天津玻璃廠生產(chǎn))，Neubauer計(jì)數(shù)盤。美國BECKMA-COULTER-LH-750原裝進(jìn)口配套試劑及全血(高、中、低)質(zhì)控物,10釅L草酸銨血小板計(jì)數(shù)稀釋液,瑞氏-吉姆薩染液(我院自制)。
 

         1.2.2血小板核查:9例均重新采血并于1h內(nèi)送檢,分別采用EDTA-Κ2抗凝管和枸櫞酸鈉抗凝管機(jī)檢血小板,觀察血小板直方圖,同時(shí)采用草酸銨稀釋液涂片手工計(jì)數(shù)血小板。另采用EDTA-Κ2抗凝管血涂片觀察有無大、小血小板及血小板聚集、衛(wèi)星現(xiàn)象。
 

         1.3臨床排查仔細(xì)查體觀察患者有無皮膚、黏膜出血,排除血小板減少的相關(guān)性疾病,檢測(cè)凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時(shí)間(TT)，進(jìn)行便隱血試驗(yàn)等。
 

         1.4結(jié)果本組均排除采血不當(dāng)、抗凝劑與血液混勻不好導(dǎo)致的血小板減少。EDTA-K2抗凝管機(jī)檢血小板結(jié)果仍明顯降低[(18~52)×109/L,平均(35±14)×109/L];血小板直方圖存在曲皺、尾部上翹、拖尾、無擬合曲線等異常,散點(diǎn)圖也有異常情況,如出現(xiàn)異常的成熟中性多核細(xì)胞、分群不明顯等;9例均行血涂片,其中5例血涂片顯示血小板聚集、巨大血小板、血小板衛(wèi)星現(xiàn)象等。枸櫞酸鈉抗凝管機(jī)檢血小板為(93~115)×109/L,平均(98±11)×109/L,血/J、板直方圖圖形正常。草酸銨稀釋液手工計(jì)數(shù)血小板為(81~119)×109/L,平均(88±19)×109/L。草酸銨稀釋液手工計(jì)數(shù)血小板低于枸櫞酸鈉抗凝管機(jī)檢血小板與手工計(jì)數(shù)的局限性(如小的血小板難以計(jì)數(shù)等)及稀釋倍數(shù)有關(guān)。9例仔細(xì)查體均無皮膚、黏膜出血,疑診為ITP的3例均行骨髓穿刺細(xì)胞學(xué)檢查, 發(fā)現(xiàn)巨核細(xì)胞產(chǎn)板良好,血小板成堆分布,排除病理性血小板減少。根據(jù)上述結(jié)果,明確為EDTAPTCP。
 

         2討論
 

         2.1影響EDTA-K2抗凝管血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的因素①與血標(biāo)本室溫下放置時(shí)間有關(guān):血標(biāo)本在采血~sOm血內(nèi)形成血小板可逆聚集體,使血小板計(jì)數(shù)下降"]。采血~sOm血后離散再進(jìn)行分析可提高結(jié)果的準(zhǔn)確性,但血標(biāo)本室溫下也不可放置時(shí)間過長(zhǎng)。許多學(xué)者認(rèn)為,室溫下放置超過120m血血小板數(shù)值將顯著減低,血小板是體積較小的細(xì)胞,胞膜薄易于黏附、聚集和破壞,室溫下離體時(shí)間過長(zhǎng),可發(fā)生變形、自溶、體積縮小,標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)破壞越多。因此,臨床應(yīng)在采血30~120min完成血小板檢測(cè)。本組復(fù)查標(biāo)本均限制在3Om血 ~1h檢測(cè)完畢。②抗凝劑與血液的比例恰當(dāng)與否可影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性:抗凝劑與血液的比例正常為⒈9,血量過多會(huì)導(dǎo)致抗凝劑力度不足,血小板凝集出現(xiàn)假性減低。本組9例復(fù)查時(shí), EDTA-K2抗凝管所測(cè)結(jié)果的血小板直方圖存在曲皺、尾部上翹、拖尾、無擬合曲線等異常,散點(diǎn)圖也有異常情況,其中5例血涂片顯示血小板聚集、巨大血小板、血小板衛(wèi)星現(xiàn)象等。③與患者疾病有關(guān):EDTA-PTCP的發(fā)生與待檢者的年齡、性別、凝血功能等無明顯相關(guān)性,多發(fā)生于重癥患者,尤其是有自身免疫性疾病、腫瘤、肝臟疾病的患者等可能與患者體內(nèi)的高免疫球蛋白、抗血小板關(guān).某些患者本身血小板數(shù)量少、體積小,儀器閾值(LH750為2sOn)的設(shè)置可能漏掉部分小體積血小板,或超過儀器設(shè)定閾值的大體積血小板,造成計(jì)數(shù)值偏低。如高膽固醇和高甘油三酯血癥患者血小板聚集性增高,糖尿病、高血壓病患者由于血管內(nèi)皮易損致血小板聚集且不易離散,而發(fā)生PTCP[14.6]。
         血液中鎂含量過高可引起假性血小板減少,可能與鎂干擾血小板黏附和凝血酶原生成,導(dǎo)致凝血障礙有關(guān)。臨床上采用硫酸鎂預(yù)防和控制產(chǎn)前子癇時(shí),當(dāng)血鎂濃度>2.陰 mmo1/L時(shí)會(huì)使血液分析儀計(jì)數(shù)血小板結(jié)果偏低。④藥物干擾:我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)患者服用某些抗生素后,易出現(xiàn)EDTA-PTCP,與Sakurai 等 [⒕]的報(bào)道一致,可能是由于抗生素刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體并與血小板隱蔽抗原發(fā)生反應(yīng),引起血小板聚集,出現(xiàn)PTCP。⑤儀器誤差:地線接觸不良、電信號(hào)線插頭與插座接觸和導(dǎo)電性能是否良好等因素也會(huì)影響血小板計(jì)數(shù)。本組PTCP可能與以上因素有關(guān),但具體機(jī)制尚待更深人的研究。

         2.2提高血小板檢測(cè)準(zhǔn)確性的措施有報(bào)道全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板計(jì)數(shù)減少((50×109/L)而患者無任何出血傾向、血栓形成時(shí),常與人工顯微鏡計(jì)數(shù)法結(jié)果有顯著性差異。提示日常工作中檢驗(yàn)醫(yī)師應(yīng)努力排除上述各種干擾,若發(fā)現(xiàn)血小板異常減低,而患者無出血傾向、血栓形成等相關(guān)血小板減少癥表現(xiàn)時(shí),應(yīng)常規(guī)行血涂片復(fù)檢,觀察血小板有無聚集現(xiàn)象仔細(xì)分析直方圖、散點(diǎn)圖,必要時(shí)用草酸銨稀釋液手工計(jì)數(shù)法結(jié)合血涂片估算法進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性;有條件的單位可采用由5磷酸吡咯醛和緩沖的枸櫞酸鈉組成的新型CPT抗凝劑重新檢測(cè),避免不必要的骨髓穿刺檢查;同時(shí)應(yīng)維護(hù)好檢驗(yàn)設(shè)各,做好實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床提供可靠的診斷資料。
 

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