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本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測豬尿、組織、飼料中的沙丁胺醇，在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來進(jìn)行的

尿樣：（稀釋倍數(shù)為2）

先加入25μL樣品稀釋液，再加入25μL尿樣到微孔板中，混合均勻。渾濁尿樣以4000 rpm離心5 min，取上清（清亮部分）。

豬肝、豬肉等組織

前處理配制的溶液

配液1：0.5M鹽酸溶液

量取41.5ml濃鹽酸加入去離子水定容到1000 ml

配液2：8%氯化鈉溶液

稱取80.0g氯化鈉，加1000ml去離子水溶解混勻

配液3：提取液

配液1：配液2=1：4比例混合

配液4：1M氫氧化鈉溶液

稱取20.0g氫氧化鈉

1．稱2±0.05 g組織放入15ml的離心管中，加入6 mL 提取液，充分搖勻后放置5-10 min；

2．室溫4000 r/min 以上離心5 min；

3．移取1ml 上清液到2ml離心管中，加入45μL配液4溶液，混勻，調(diào)整PH值7-8。

4. 取50μL下層進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：4

飼料（稀釋倍數(shù)10）

1．用研缽研碎飼料，稱1 g研碎的飼料樣品加入10 mL 0.01 M的鹽酸，充分混合5 min。2．檢查pH值是否在6.5-8之間，否則用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)。

3．3500 rpm離心5 min，轉(zhuǎn)移出上清液（如上清液仍然渾濁可提高轉(zhuǎn)速或用濾紙過濾）。4．吸取50μL進(jìn)行檢測。

1．將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出，置室溫（20-25 ℃）平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2．按需要取出微孔條及板架，將不用的微孔板重新密封，保存于2-8 ℃，不要冷凍。

3．加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 μL /孔，然后加入抗體工作液50 μL /孔，再振蕩混勻，用封板膜蓋板，37 ℃反應(yīng)30 min。

4．洗板4-5次，每次浸泡30秒，拍干。

5．加入酶標(biāo)記物100 μL /孔，用封板膜蓋板，37 ℃反應(yīng)20 min。

6．洗板4-5次，每次浸泡30 s，拍干。

7．顯色：每孔加入底物緩沖液50 μL，再加底物液50 μL，輕輕振蕩混勻，37 ℃環(huán)境避光顯色10 min。

8．測定：每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處（在20 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定吸光度值。

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