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產(chǎn)品描述
招商說明

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通用名：豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcinecircovirus (ELISA)
【預(yù)期用途】

本試劑盒用于檢測(cè)豬血清中豬圓環(huán)病毒抗體。評(píng)估豬場(chǎng)豬圓環(huán)苗免疫狀況，感染豬的血清學(xué)診斷。

【原理】

本試劑盒系由預(yù)包被豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCVⅡ）CAP重組蛋白的微孔板和酶標(biāo)記二抗及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清或血漿中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在包被板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型的特異性抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。

【試劑盒組成】

1.	豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗原預(yù)包被微孔板條	96T×1
2.	酶標(biāo)記物 (紅蓋)	11ml×1
3.	樣品稀釋液 (黃蓋)	25ml×1
4.	20X濃縮洗滌液 (透明蓋)	20ml×1
5.	底物液A (白蓋)	6ml×1
6.	底物液B (黑蓋)	6ml×1
7.	終止液 (黃蓋)	6ml×1
8.	陽(yáng)性對(duì)照 (紅蓋，已滅活)	0.5ml×1
9.	陰性對(duì)照 (綠蓋，已滅活)	0.5ml×1
10.	蓋板膜	1張
11.	自封袋	1個(gè)
12.	說明書	1份

【樣品制備】 取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品短期可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。

【樣品稀釋】 用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。

【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右），并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

【試驗(yàn)操作方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl；空白對(duì)照孔不加。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A450）。

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