【測(cè)定原理】 本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的AMOZ,在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行的,樣本中的AMOZ和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗呋喃它酮代謝物的衍生物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣品中的AMOZ含量與樣品的吸光度值呈反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出呋喃它酮代謝物含量。 【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】 規(guī) 格:96孔/盒 靈 敏 度: 0.05ppb 檢測(cè)時(shí)間: 75min 樣本檢測(cè)下限: 組織、肝臟………………………………0.1ppb 蜂蜜、牛奶、腸衣………………………0.1ppb 魚(yú)/蝦等水產(chǎn)品組織因存在一定的干擾,檢測(cè)下限為0.15ppb 交叉反應(yīng)率: 呋喃它酮代謝物……………………………… 呋喃西林代謝物………………………………﹤0.1% 呋喃妥因代謝物………………………………﹤0.1% 呋喃唑酮代謝物………………………………﹤0.1% 回收率: 組織、肝臟………………………………90%±15% 蜂蜜、牛奶、腸衣………………………80%±15% 【試劑盒組成】 1、 微量測(cè)試孔:1×96孔板(12條×8孔) 2、 標(biāo)準(zhǔn)液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb 3、 酶標(biāo)記物 7ml………………… 紅色帽 4、 抗體工作液 7ml………………… 藍(lán)色帽 5、 底物A液 7 ml………………… 白色帽 6、 底物B液 7 ml ………………… 黑色帽 7、 終止液 7 ml ………………… 黃色帽 8、 20X濃縮洗滌液40 ml…………… 白色帽 9、 2X濃縮復(fù)溶液 50 ml …………… 透明帽 10、 衍生化試劑 10ml ………………白色帽
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測(cè)的組織樣本包括:動(dòng)物組織、禽類(lèi)和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、豬、牛、羊、兔、魚(yú)、蝦等。
(b)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(c)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本前處理需配制:
配液1、用去離子水將2×濃縮復(fù)溶按1:1稀釋?zhuān)?份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水),用于提取后的樣本復(fù)溶。
配液2、C液:稱(chēng)10.7g亞硝基鐵******用去離子水定容至100ml。
配液3、D液:稱(chēng)28.8g 硫酸鋅用去離子水溶解定容至100ml。
配液4、 0.1MK2HPO4 稱(chēng)11.4g K2HPO4?3H2O加去離子水溶解定容至500ml。
配液5、 1M HCl 溶液
取8.6ml濃HCl加去離子水定容至100ml。
配液6、1M NaOH溶液
取4g NaOH加去離子水定容至100ml。
樣本的處理方法:
(a) 奶樣
1、 取出5ml的奶樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250μl。
2、 用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機(jī)4000r/min,2-10℃離心10min.若沒(méi)有恒溫離心機(jī),則先將樣本降溫至大約8℃,然后離心。
3、 接(b)的描述方法
(b) 組織、蜂蜜、腸衣、肝臟
1、 取1±0.05g的均質(zhì)樣本(組織、蜂蜜、腸衣、肝臟),牛奶的離心上清液1.1ml(相當(dāng)1ml奶樣),分別加入4ml的去離子水,0.5ml1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。
2、 在37℃過(guò)夜孵育(大約16h)或56℃水浴中孵育(2h);
3、 分別加入5ml 0.1M K2HPO4, 0.4 ml 1M NaOH和5ml乙酸乙酯,充分振蕩5min;
4、 在室溫下(20-25℃)4000r/min以上離心10min。
5、 取出2.5ml的乙酸乙酯到另一潔凈容器中于50℃氮?dú)?空氣吹干。
6、 用1ml正己烷溶解干燥物,用1ml已稀釋好的復(fù)溶液充分混合30s;在室溫下(20-25℃)4000r/min以上離心10min。
7、 取50μl下層相用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):2
(c)特殊樣本(油炸熟食、非油炸熟肉)的處理方法
1、取1±0.05g的均質(zhì)樣本于50ml離心管中,加入4.5ml甲醇和0.5ml去離子水,震蕩2min,
4000r/min離心5min,傾倒出全部液體,再加入5 ml乙腈和5ml 正己烷,震蕩2min,4000r/min離心5min傾倒出全部液體。
2、 在處理后的樣本離心管中加入4ml的去離子水,0.5ml1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。
3、 接(b)第2步描述方法 更多 呋喃它酮代謝物快速檢測(cè)試劑盒 價(jià)格、說(shuō)明、廠家,請(qǐng)關(guān)注3618醫(yī)療器械網(wǎng) 暫無(wú)內(nèi)容,請(qǐng)聯(lián)系商家咨詢(xún)?cè)斍?
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