【測定原理】 本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物氯霉素和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗氯霉素抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物氯霉素的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物氯霉素的含量。
氯霉素是一種廣譜抗生素，具有很好的抗菌效果，常用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中，然而，氯霉素會(huì)造成人的再生障礙性貧血，而且誘發(fā)濃度還沒有確定，所以目前已經(jīng)禁止在動(dòng)物及食品中使用氯霉素。氯霉素快速檢測試劑盒具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn)，適用于大批量樣品快速檢測。 【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】 規(guī) 格：96孔/盒 靈 敏 度： 0.05ppb 檢測時(shí)間： 75min 樣本定量檢測下限： 腸 衣………………………………………………0.1ppb 蜂 蜜………………………………………………0.1ppb 牛 奶………………………………………………0.05ppb 尿液、血清…………………………………………0.1ppb 組織、肝臟……………………………………… 0.025ppb 飼 料………………………………………………0.15ppb 樣本回收率： 組織、肝臟………………………………………80%±10% 蜂蜜、腸衣………………………………………70%±10% 牛奶、飼料………………………………………85%±15% 尿液、血清………………………………………70%±10% 交叉反應(yīng)率 氯霉素……………………………………………… 甲砜霉素…………………………………………… < 0.1% 氟甲砜霉素…………………………………………< 0.1% 【試劑盒組成】 1、 微量測試孔：1×96孔板（12條×8孔） 2、 標(biāo)準(zhǔn)液X6瓶：（1ml/瓶） 0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb 3、 酶標(biāo)記物 12ml……………………紅色帽 4、 抗體工作液 7ml…………………… 綠色帽 5、 底物 A 液 7ml…………………… 白色帽 6、 底物 B 液 7 ml…………………… 黑色帽 7、 終 止 液 7 ml…………………… 黃色帽 8、 20X濃縮洗滌液 40ml………………透明帽 9、 2X濃縮復(fù)溶液 50ml………………透明帽
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí)，都必須注意：
（a）本試劑盒所檢測的組織樣本包括：動(dòng)物組織、
禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚、蝦等。
（b）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
（c）實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本前處理需配制：
配液1、C液（牛奶樣本使用）：
0.36M 亞硝基鐵******（Na2Fe(CN)5?NO?2H2O）10.7g 亞硝 基鐵******加去離子水100ml溶解。
配液2、D液（牛奶樣本使用）：
1M硫酸鋅（ZnSO4?7H2O）28.8g硫酸鋅加去離子水100ml溶解。
配液3、 pH4.8 100mM醋酸鈉緩沖液（尿樣本使用）：稱2.4g醋酸鈉和1.2ml醋酸加去離子水500ml溶解混合。
配液4、乙腈-水溶液 V乙腈：VH2O＝84：16
配液5、 將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按1：1稀釋。(1份濃縮復(fù)溶掖+1份去離子水，用于抗體的稀釋和樣本提取后的復(fù)溶)。
（a）組織、肝臟樣本前處理方法
1、 用均質(zhì)器均質(zhì)組織樣本；
2、 稱3±0.05g樣本于離心管中，先加入3ml去離子水充分混勻再加入6ml乙酸乙酯，振蕩5min，室溫4000r/min以上，離心10min；
3、 取出4ml上層液體在氮?dú)饬?0-60℃水浴中干燥；
4、 加入1 ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加1ml稀釋后的復(fù)溶液強(qiáng)烈振蕩混合30s，室溫4000r/min以上離心5min。
5、 取50 μl下層相用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：0.5
（b）血清血漿
1、 取1ml血清或血漿至試管中，加2ml乙酸乙酯振蕩1min；
2、 靜置使水相與有機(jī)相分層或室溫4000r/min離心5min；
3、 移取上層的乙酸乙酯至另一試管中，用氮?dú)饬?0℃水浴中干燥；
4、 殘留物用1 ml稀釋后的復(fù)溶液溶解，混合30s；
5、 取50μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：1
（c） 尿液
1、 移取2ml尿液到離心管中，加pH4.8 100mM醋酸鈉緩沖液0.5ml混合；
2、 加40μl葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)到稀釋的尿液中，在37℃水解至少2小時(shí)（或過夜）；
3、 該溶液恢復(fù)至室溫后加入8ml乙酸乙酯混合1min；
4、 室溫4000r/min離心10min，取出4ml上層液體在氮?dú)庀?0～60℃干燥；
5、 用1ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物，混合30s；
6、 取50μl 用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：1
（d）蜂蜜
1、 取2±0.05 g蜂蜜，放入離心管中，用4ml去離子水溶解；
2、 加入4ml乙酸乙酯上下振蕩5min；
3、 室溫4000r/min以上離心10min；
4、 移取2ml上層清澈液到另一離心管中，50-60℃氮?dú)饬飨赂稍铮?/span>
5、 用0.5ml稀釋后的復(fù)溶液溶解，混合30s；
6、 取50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：0.5 檢測下限：0.025ppb
定量下限：0.1 ppb
注：我們0.1 ppb為陽性樣本的cut off值。
（e）腸衣
1、 用均質(zhì)器均質(zhì)樣本注：干樣本需剪碎（長度不超5mm）后再均質(zhì)，濕樣本需用去離子水漂洗20min以上(去除表面的鹽份)，瀝干后再進(jìn)行均質(zhì)。
2、 稱1±0.05g均質(zhì)后的樣本于離心管中，加入10ml乙酸乙酯，振蕩5min，室溫4000r/min以上，離心10min。
3、 取出5ml上層液體（相當(dāng)于0.5g的樣本）在氮?dú)饬飨?0-60℃干燥。
4、 加入1 ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加0.5ml稀釋后的復(fù)溶液強(qiáng)烈振蕩混合30s，室溫4000r/min以上，離心5min。
5、 去上層相，取下層50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：1
（f）牛奶和奶粉
牛奶樣本處理方法一
1、 牛奶樣本，10℃4000r/min以上離心10min，吸除上層脂肪；
2、 取5ml去除脂肪奶樣至離心管中，加入150μlC液出現(xiàn)沉淀，短暫振蕩后加入150μlD液混合；
3、 15℃4000r/min以上，離心10min，移取上層液；
4、 用稀釋后的復(fù)溶液以等體積稀釋上層液，混合30s；
5、 取50μl用于分析。
注：如果離心后仍然渾濁，再重復(fù)沉淀過程。
樣本稀釋倍數(shù)：2 檢測下限：0.1ppb
定量下限：0.15ppb
牛奶樣本處理方法二
1、 取5ml去除脂肪奶樣至離心管中；
2、 加入250μlC液和250μlD液混合，4-12℃4000r/min以上離心10min。如果沒有冷凍離心機(jī)，請預(yù)先將樣本冷卻到8℃；
3、 轉(zhuǎn)移出2.2ml上層液（相當(dāng)于2ml奶樣）至一個(gè)新的離心管中，加入4ml乙酸乙酯上下振蕩5min；
4、 室溫（20-25℃）4000r/min以上離心10min ；
5、 轉(zhuǎn)移出2ml乙酸乙酯上層液體（相當(dāng)于1ml奶樣），60℃氮?dú)饬飨峦耆稍铮?/span>
6、 用0.5ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物，混合30s；
7、 取50μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：0.5 檢測下限：0.025ppb
定量檢測限：0.05ppb
由于陰性樣本可能會(huì)產(chǎn)生背景干擾 （在某些情況下干擾數(shù)值在標(biāo)準(zhǔn)2到3之間），所以標(biāo)準(zhǔn)3作為陽性結(jié)果的CUT OFF判斷值。
奶粉樣本處理方法
1、 稱2±0.05 g奶粉至離心管中，加入10ml去離子水，振蕩溶解；
2、 加1ml C液和1ml D液混合。4-12℃4000r/min以上離心10min。若無冷凍離心機(jī)，請預(yù)先將樣本冷卻到8℃；
3、 轉(zhuǎn)移出3.6ml上層液（相當(dāng)于0.6g奶粉）至一個(gè)新的離心管中，加入6ml乙酸乙酯上下來回振蕩5min；
4、 室溫（20-25℃）4000r/min以上離心10min；
5、 轉(zhuǎn)移出4ml乙酸乙酯上層液體（相當(dāng)于0.4g奶粉），60℃氮?dú)饬飨峦耆稍铮?/span>
6、 用0.4ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物，混合30s；
7、 取50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：1 檢測下限：0.05ppb
定量檢測限：0.15ppb
由于陰性樣本可能會(huì)產(chǎn)生背景干擾 （在某些情況下干擾數(shù)值在標(biāo)準(zhǔn)2到3之間），所以標(biāo)準(zhǔn)3作為陽性結(jié)果的CUT OFF判斷值。
（g）蛋類
1、 用均質(zhì)器低速均質(zhì)樣本(蛋黃或全蛋)；
2、 稱取3±0.05 g均質(zhì)過的樣本，與9ml乙腈-水溶液（84︰16；V乙腈︰V水）振蕩5min，15℃ 4000r/min以上離心10min；
3、 取3ml上層與3ml蒸餾水混合，加入4.5ml 乙酸乙酯混合5min，15℃4000r/min以上離心10min；
4、 將上層有機(jī)相轉(zhuǎn)移到試管中50℃下氮?dú)獯蹈桑?/span>
5、 加入1ml正己烷溶解殘留物后，用2ml稀釋后的復(fù)溶液混合30s，離心去除正己烷。
6、 取50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：2 檢測下限：0.1ppb
定量檢測限：0.3ppb
（h）飼料
1、 稱取2±0.05g均質(zhì)過的飼料樣本，加入2ml去離子水，再加入6ml乙酸乙酯，充分振蕩2min，15℃ 4000r/min以上離心10min；
2、 取2ml上層有機(jī)相到試管中56℃下氮?dú)獯蹈桑?/span>
3、 加入1ml正己烷溶解殘留物，用1ml稀釋后的復(fù)溶液混合30s，離心去除上層正己烷。
4、 取50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)：3 檢測下限：0.15ppb 更多 氯霉素快速檢測試劑盒 價(jià)格、說明、廠家，請關(guān)注3618醫(yī)療器械網(wǎng) 暫無內(nèi)容，請聯(lián)系商家咨詢詳情
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