TNF-α、IL-6與高血壓腎損害的相關(guān)性研究

　　作者：葛利軍,楊震,于欣,欒紅,魏述軍,王全山　　作者單位：寧夏自治區(qū)人民醫(yī)院，寧夏 銀川 750021寧夏醫(yī)科大學(xué)，寧夏 銀川 750004

　　【摘要】 目的 探討TNF-α、IL-6與高血壓腎損害發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系。方法 將102例高血壓患者根據(jù)其尿蛋白排泄率檢測結(jié)果分為3組:單純高血壓組37例，高血壓微量蛋白尿組36例，高血壓臨床蛋白尿組29例。采用放射免疫檢測法檢測血清TNF-α、IL-6水平。同期選擇30例健康體檢者作為正常血壓對照組。結(jié)果 高血壓各組血清TNF-α、IL-6水平均高于正常血壓對照組(P<0.05)，隨著尿蛋白排泄率的增加，TNF-α、IL-6水平呈上升趨勢，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高血壓各組血清細(xì)胞因子水平與尿蛋白排泄率成正相關(guān)(r=0.51，P<0.01)，而與血壓水平無相關(guān)性。結(jié)論 高血壓腎損害患者血清TNF-α、IL-6水平明顯升高，TNF-α、IL-6可能參與了高血壓腎損害的發(fā)生和發(fā)展。

　　【關(guān)鍵詞】 高血壓腎損害,腫瘤壞死因子α,白細(xì)胞介素6

　　[Abstract] ob[x]jective To investigate the changes of the serum levels of necrosis alpha (TNF-α) and interleukin 6 (IL-6) in patients with hypertensive renal damage, whereby to try to study the correlation of TNF-αand IL-6 with the hypertensive renal damage.Methods 102 patients with primary hypertension were divided into three groups according to their urinary albumin excretion rate: normoalbuminuric hypertensive group (n=37), microalbuminuric hypertensive group (n=36) and proteinuric hypertensive group (n=29). Serum TNF-αand IL-6 were measured with radioimmune assay and 30 normotensive persons were selected as control group.Results Serum levels of TNF-αand IL-6 were significantly higher in patients with primary hypertension than those in normotensive control group(P<0.5). Serum levels of TNF-α and IL-6 showed the tendency of increase with the development of urinary albumin excretion. The significance was present among groups(P<0.05). TNF-αand IL-6 were found to have a positive correlation with urinary albumin excretion rate (r=0.79, P<0.01; r=0.75,P<0.01), but no correlation with the level of blood pressure.Conclusion serum TNF-αand IL-6 are remarkably increased in hypertensive patients and may play an important role in the pathogenesis and development of hypertensive renal damage.

　　[Key words] Hypertensive renal damage; tumor necrosis factor alpha; interleukin 6

　　本研究通過檢測不同組別高血壓患者中細(xì)胞因子及尿蛋白水平，探討細(xì)胞因子在高血壓腎損害發(fā)生發(fā)展中的作用。

　　1 資料與方法

　　1.1 研究對象：根據(jù)1999年世界衛(wèi)生組織和國際高血壓學(xué)會(WHO/ISH)原發(fā)性高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇我院2008年7月至2008年12月原發(fā)性高血壓患者102例，其中男60例，女42例，平均年齡(56.7±11.2)歲，血壓水平為1、2級。根據(jù)尿蛋白排泄率測定結(jié)果將所有入選患者分為3組:單純高血壓組(尿蛋白排泄率 <20μg/min)37 例，男 22 例，女15例，平均年齡 (51.4±13.4)歲。高血壓微量蛋白尿組(20μg/min<尿蛋白排泄率<200μg/min)36例，男19例，女17例，平均年齡(54.8±10.6)歲。高血壓臨床蛋白尿組(尿蛋白排泄率>200μg/min)29例，男19例，女10例，平均年齡(53.2±13.2)歲。另選健康體檢者30例作為健康對照組，男17例，女13例，平均年齡(50.5±11.1)歲。所有入選患者均排除繼發(fā)性高血壓、冠心病、糖尿病、嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎功能不全、心瓣膜病、心力衰竭、自身免疫性疾病、腫瘤、感染性疾病、應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)劑、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病及代謝性疾病，所有病例進(jìn)入研究前停用降壓藥及其他藥物五個半衰期，不吸煙、不飲酒3個月以上。4組間的年齡、性別和體重指數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

　　1.2 血標(biāo)本采集：所有患者在入選后清晨空腹靜臥半小時后抽取靜脈血5ml，立即在4℃條件下3000rpm離心10min，分離血清，-70℃冰箱凍存，同期采取正常血壓對照組血清標(biāo)本并保存，后統(tǒng)一測定。

　　1.3 實(shí)驗(yàn)方法：24h尿蛋白排泄率測定：入選患者留取2次(間隔1周以上)24h尿標(biāo)本(7:00-次日7:00)，測定總量后取5ml，離心，取上清液置于-20℃冰箱凍存，后統(tǒng)一用放射免疫法測定尿白蛋白，然后計(jì)算出24h尿白蛋白排除率(μg/min)。

　　TNF-α和IL-6測定：用放射免疫檢測法測定血清TNF-α和IL-6，操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。TNF-α靈敏度<0.3ng/ml，批內(nèi)變異系數(shù)<5%，批間變異系數(shù)<8%。IL-6靈敏度<50pg/ml，批內(nèi)變異系數(shù)<5%，批間變異系數(shù)<15%，測定范圍為50-4000 pg/ ml，非特異性結(jié)合<5%，與TNF-α、IL-2、IL-8、IGF-2、TGF-α均無交叉反應(yīng)。

　　1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：全部數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理，服從正態(tài)分布的計(jì)量資料以(±s)表示。在服從正態(tài)分布和方差齊的條件下，計(jì)量資料的兩組間比較采用t檢驗(yàn)，三組及三組以上比較用方差分析，方差分析中均數(shù)的兩兩比較用Student Newman Keuls Test及Least Significance Difference Procedure，參數(shù)間相關(guān)性用直線相關(guān)分析。計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2 結(jié)果

　　2.1 各組一般臨床情況及各參數(shù)的比較(表1)：正常血壓對照組和高血壓各組的年齡、性別構(gòu)成、體重指數(shù)、血糖、血脂、尿素氮及肌酐的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。單純高血壓組和正常血壓對照組的尿蛋白排泄率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高血壓微量蛋白尿組和高血壓臨床蛋白尿組的尿蛋白排泄率顯著高于正常血壓對照組及單純高血壓組，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高血壓各組血清TNF-α、IL-6水平均高于正常血壓對照組(P<0.05)，且隨著尿蛋白排泄率的增加，TNF-α、IL-6水平呈上升趨勢，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

　　表1 正常血壓對照組和高血壓各組一般情況及各參數(shù)的比較(略)

　　注:與正常血壓對照組比較，*P<0.01;與單純高血壓組比較，#P<0.01;與微量蛋白尿組比較，+P<0.01

　　2.2 TNF-α和IL-6與尿蛋白排泄率的相關(guān)性(圖1-2)：高血壓各組血清TNF-α和IL-6水平與尿蛋白排泄率成正相關(guān)(r=0.79，P<0.01;r=0.75，P<0.01)，而與收縮壓、舒張壓水平無相關(guān)性。

　　3 討論

　　本研究檢測并比較了高血壓病患者和健康體檢者之間血清TNF-α和IL-6水平，結(jié)果表明，在年齡、體重指數(shù)、血糖、血脂、尿素氮及肌酐的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的情況下，高血壓患者血清中的TNF-α和IL-6顯著高于正常血壓對照組，提示TNF-α和IL-6可能參與了高血壓病的發(fā)生發(fā)展。推斷其可能因?yàn)楦哐獕翰∵^程中存在著細(xì)胞免疫功能的紊亂和炎癥反應(yīng)[1，2]。

　　本研究主要監(jiān)測并比較了單純高血壓組、微量蛋白尿高血壓組和臨床蛋白尿高血壓組間血清TNF-α和IL-6水平，結(jié)果表明臨床蛋白尿高血壓組的血清TNF-α和IL-6水平明顯高于微量蛋白尿高血壓組和單純高血壓組，而微量蛋白尿組血清TNF-α和IL-6水平明顯高于單純高血壓組。直線相關(guān)分析還表明血清TNF-α和IL-6水平和尿蛋白排泄率呈正相關(guān)，提示TNF-α和IL-6可能參與了高血壓腎損害的發(fā)生和發(fā)展，是高血壓腎病的危險(xiǎn)因素和預(yù)測因子[3，4]。高血壓時增高的IL-6和TNF-α提升了機(jī)體的炎癥免疫反應(yīng)，產(chǎn)生過多的免疫復(fù)合物，這些免疫復(fù)合物可直接增加腎小球通透性，同時可激活補(bǔ)體，產(chǎn)生C3a、C5a等趨化因子吸引炎癥細(xì)胞，釋放炎癥因子、蛋白溶解酶、活性氧，導(dǎo)致腎組織損害。IL-6可誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞在腎間質(zhì)浸潤，在免疫反應(yīng)介導(dǎo)的腎臟疾病中起著重要作用[5]。TNF-α能使血小板在內(nèi)皮細(xì)胞聚積形成血栓，還可誘發(fā)系膜細(xì)胞產(chǎn)生組織因子樣活性物質(zhì)，并使前凝血物質(zhì)活性增加，影響凝血及纖溶系統(tǒng)。有研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α能刺激腎小球系膜細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基，從而使氧化脂質(zhì)代謝產(chǎn)物增多，造成細(xì)胞內(nèi)膜損傷[6]。此外，IL- 6、TNF-α還可促進(jìn)系膜細(xì)胞收縮及增殖[7-9]、基質(zhì)增生，促進(jìn)腎小球硬化，并可刺激纖維母細(xì)胞增生，產(chǎn)生膠原纖維，導(dǎo)致腎臟纖維化。IL-6還能刺激間質(zhì)細(xì)胞合成和釋放膠質(zhì)酶和其他細(xì)胞外蛋白酶，引起基底膜處帶負(fù)電荷的糖蛋白降解，進(jìn)而導(dǎo)致血漿中帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)滲漏，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白尿的發(fā)生。