病毒性肝炎患者葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測的臨床意義

      作者：劉運周,曾學(xué)平,肖洋　　作者單位：中國人民解放軍第421醫(yī)院檢驗科,廣州

　　【摘要】 目的 探討紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測對甲、乙型病毒性肝炎患者的臨床意義。方法 采用高鐵血紅蛋白還原試驗定量檢測259例甲型病毒性肝炎患者、303例乙型病毒性肝炎患者及593例對照者紅細胞G-6-PD的活性。結(jié)果 對照組中G-6-PD缺陷20例(3.37%)，甲型病毒性肝炎組G-6-PD缺陷31例(11.97%)，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=23.67，P<0.01);乙型病毒性肝炎組G-6-PD缺陷20例(6.60%)，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.90，P<0.05);甲、乙型病毒性肝炎組的G-6-PD缺陷率差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.88，P<0.05)。結(jié)論 檢測甲、乙型病毒性肝炎患者的紅細胞G-6-PD水平，對防止在治療過程中并發(fā)溶血性貧血有較重要的作用。

　　【關(guān)鍵詞】 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶;甲型病毒性肝炎;乙型病毒性肝炎;缺陷率

　　葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase，G-6-PD)缺陷是新生兒溶血發(fā)病的重要危險因素之一，對新生兒進行G-6-PD篩查是預(yù)防發(fā)生溶血的有效輔助手段[1-3]。病毒性肝炎是嚴重影響人類健康的疾病[4]，可誘發(fā)G-6-PD缺陷患者溶血[5]。為探討紅細胞G-6-PD檢測對甲、乙型病毒性肝炎的臨床意義，尤其是在治療時指導(dǎo)用藥的意義，作者檢測了562例臨床確診為甲、乙型病毒性肝炎的住院患者紅細胞G-6-PD的活性，現(xiàn)報道如下。

　　1 資料與方法

　　1.1 研究對象

　　(1)病毒性肝炎組：562例，為2004年8月至2006年9月在中國人民解放軍第421醫(yī)院傳染科住院患者，其中甲型病毒性肝炎患者259例，男152例，女107例，年齡16.2～65.8歲，平均(36.7±13.8)歲;乙型病毒性肝炎患者303例，男175例，女128例，年齡15.3～68.1歲，平均(38.3±12.5)歲。診斷標(biāo)準符合2000年全國西安病毒性肝炎學(xué)術(shù)會議制定的診斷標(biāo)準[6]。(2) 對照組：593例，為同期在中國人民解放軍第421醫(yī)院體檢及住院患者，主要為心、腦血管病、消化道疾病、呼吸道疾病、外傷等患者，其中男357例，女236例，年齡15.6～70.2歲，平均(37.9±14.1)歲。3組性別經(jīng)χ2檢驗差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ性別2=5.17，P=0.141);3組年齡經(jīng)方差分析差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F年齡=0.1124，P=0.8938)。

　　1.2 檢測方法

　　采用高鐵血紅蛋白還原試驗定量法檢測G-6-PD酶活性。于試管中加109 mmol•L-1枸櫞酸鈉0.2 mL、葡萄糖20 mg，取靜脈血1.8 mL搖勻，3 000 r•min-1離心5 min后調(diào)整血細胞與血漿比例為11，混勻后取0.2 mL加0.18 mol•L-1的亞硝酸鈉葡萄糖液與0.4 mmol•L-1美藍液的等量混合液0.02 mL，顛倒混勻15次，加塞置37 ℃水浴3 h，取此液0.05 mL加0.02 mol•L-1 pH7.5磷酸鹽緩沖液5 mL混勻，2 min后用蒸餾水作空白于635 nm波長下，722型分光光度計測取其吸光度“A”;另取未加亞硝酸鈉葡萄糖液保濕的血液0.05 mL加0.02 mol•L-1 pH7.5的磷酸鹽緩沖液5 mL，混勻2 min后測其吸光度“B”;然后再加入亞硝酸鈉葡萄糖液1滴混勻，5 min后用同樣方法測其吸光度“S”，其高鐵血紅蛋白還原率=1-(A-B)/(S-B)。參考范圍：本實驗室參考范圍定為高鐵血紅蛋白還原率>0.75。

　　1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

　　率的比較用χ2檢驗，所有統(tǒng)計分析均用SPSS 11.5統(tǒng)計分析包進行統(tǒng)計分析。

　　2 結(jié)果

　　在臨床確診的562例甲、乙型病毒性肝炎患者中有51例G-6-PD缺陷(9.07%)，其中甲型肝炎259例中G-6-PD缺陷31例(11.97%)，乙型肝炎患者303例中G-6-PD缺陷20例(6.60%);593例對照者中有G-6-PD缺陷20例(3.37%);甲型肝炎組與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=23.67，P<0.01);乙型肝炎組與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.90，P<0.05);甲型肝炎組與乙型肝炎組相比差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.88，P<0.05)。

　　3 討論

　　G-6-PD缺陷癥是一種χ性連鎖隱性遺傳性疾病。G-6-PD基因突變是造成酶活性降低的根本原因，目前，全世界已鑒定的G-6-PD基因突變型超過70多種，中國有13種，其中1 376M、1 388M、95M 3種基因點突變是廣東人主要的G-6-PD基因突變型[7]。

　　有研究指出，紅細胞G-6-PD缺陷患者由于其肝細胞膜的G-6-PD可能亦存在缺陷，從而影響肝細胞膜的正常功能，故易遭受病毒攻擊而感染[5]。本組研究表明，甲、乙型病毒性肝炎組G-6-PD缺陷率分別為11.97%和6.60%，均較對照組的缺陷率3.37%高，也證實了這一點，從而提示紅細胞G-6-PD缺陷者感染病毒性肝炎的機率較其他群體增大，尤其更易感染甲型病毒性肝炎，這可能與甲型肝炎病毒侵襲肝細胞膜的模式有關(guān)，其具體機制有待進一步研究。

　　G-6-PD是磷酸戊糖旁路代謝的起始酶[8]，它具有遞氫作用，使氧化型輔酶Ⅱ(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP+)還原為還原型輔酶Ⅱ(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)。NADPH是紅細胞內(nèi)重要的還原物質(zhì)，能使紅細胞內(nèi)氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)還原為還原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)。GSH為細胞清除氧自由基的重要物質(zhì)[9]，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成，在人體內(nèi)具有活化氧化還原系統(tǒng)、激活含有巰基酶、解毒等重要作用[10]，維持血紅蛋白及其他酶類中的巰基免受氧化損害，從而起到保護紅細胞的作用。當(dāng)G-6-PD缺陷患者受到病毒、細菌感染或氧化劑藥物的毒素作用時，其紅細胞內(nèi)不能產(chǎn)生足夠的GSH，致使血紅蛋白中巰基被氧化，血紅蛋白發(fā)生沉淀并附于紅細胞膜內(nèi)面，形成變性珠蛋白小體，加上紅細胞膜脂質(zhì)和膜蛋白巰基的氧化，其流動性和變形性發(fā)生改變，導(dǎo)致溶血[11]。溶血后肝細胞處理血紅素的負擔(dān)加重，進一步缺氧，從而加重了肝細胞的損害;其氧化性代謝產(chǎn)物進一步聚積，GSH進一步減少，又加重了溶血，如此形成惡性循環(huán)。某些氧化性藥物，如阿斯匹林、非那西汀、磺胺嘧啶、伯氨喹啉、呋喃唑酮及磺胺異惡唑等，均能誘發(fā)G-6-PD缺陷患者發(fā)生溶血，加重肝細胞的損害。因此，檢測病毒性肝炎患者紅細胞G-6-PD活性，可確定其是否存在G-6-PD缺陷，從而盡量避免使用上述藥物，以免誘發(fā)溶血性貧血。

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