循環(huán)月中瘤細(xì)胞在泌尿系月中瘤的研究進(jìn)展1

[摘要]外周血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞是惡性腫瘤患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要原因。近年來(lái)，針對(duì)性的研
究促進(jìn)了人們對(duì)腫瘤發(fā)展機(jī)制的認(rèn)識(shí)，對(duì)患者臨床分期、腫瘤轉(zhuǎn)移、預(yù)后判斷以及個(gè)體化治療具有深遠(yuǎn)意
義。泌尿系統(tǒng)腫瘤異質(zhì)性高，易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。本文復(fù)習(xí)近年來(lái)相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中循環(huán)腫瘤

細(xì)胞的研究現(xiàn)狀作一簡(jiǎn)單概述。

 [關(guān)鍵詞]循環(huán)腫瘤細(xì)胞；腎細(xì)胞癌；膀胱癌；前列腺癌；泌尿系腫瘤 doi:10. 13 201／j. issn. 1001-14 20. 2015. 03. 024

Progress on circulating tumor cells in urologic neoplasms
ZHANG Yang TIAN Junqiang
( Department of Urology, Lanzhou University Second Hospital；Institute of Urology of Lanzhou University Second Hospital; Key Laboratory of Urological Diseases in Gansu Province; Gansu Nephro-Urological Clinical Center, Lanzhou, 730030, China)
Corresponding author: TIAN Junqiang, E-mail: tjq007263@sina. com
Abstract Circulating tumor cells in peripheral blood i.s an important cause of cancer recurrence and distant me[x]tastases in patients. In recent years, targeted research has improved knowledge of the mechanisms of tumor development, and has far-reaching significance on the judgement of the clinical stage, tumor me[x]tastasis, prognosis and individual treatment. Urinary system tumors are characterized by high heterogeneity, high-risk relapse and me[x]tastasis. This paper reviewed the recent literature and briefly discussed on

urological cancer researches of circulating tumor cells.
Key words circulating tumor cell; renal cell carcinoma; bladder cancer; prostatic

cancer; urologic neoplasm
惡性腫瘤嚴(yán)重影響當(dāng)代人的健康。目前，癌癥在世界死亡原因中居第二位[1]，導(dǎo)致腫瘤患者死亡主要的因素是轉(zhuǎn)移[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，超過(guò)90%的癌癥患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移[3]。實(shí)體腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程是一個(gè)級(jí)聯(lián)放大的瀑布式反應(yīng)。初腫瘤細(xì)胞的無(wú)序生長(zhǎng)使它們喪失了相互粘附的能力，然后它們通過(guò)釋放細(xì)胞因子刺激血管生成，在后者的作用下，松散的腫瘤細(xì)胞可以穿過(guò)血管和淋巴管，進(jìn)入血液循環(huán)和（或）淋巴循環(huán)。腫瘤細(xì)胞的脫落、侵襲并進(jìn)入血液循環(huán)是實(shí)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移的初階段，很大一部分發(fā)生凋亡，少數(shù)具有高度活力、高度轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞在循環(huán)系統(tǒng)中存活下來(lái)，并為終形成腫瘤轉(zhuǎn)移灶提供了可能，而這一程序很可能發(fā)生在原發(fā)癌診斷之前。盡管進(jìn)入血液的腫瘤細(xì)胞并不能全部存活并種植轉(zhuǎn)移，但循環(huán)腫瘤細(xì)胞( Circulating tumor cells，CTCs)的存在是腫瘤發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的必要條件。越來(lái)越多的研究表明血液中存在的CTCs是腫瘤轉(zhuǎn)移及較差預(yù)后的重要標(biāo)記[4,5]。本文就目前循環(huán)腫瘤細(xì)胞在泌尿系腫瘤方面的研究進(jìn)展做一綜述。

 1概述
1.1概念
1869年，Ashworth在1例乳腺癌死亡患者外周血中發(fā)現(xiàn)類似腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞，并提出循環(huán)腫瘤細(xì)胞的概念，也稱血液稀有細(xì)胞、腫瘤微小轉(zhuǎn)移病灶和潛伏腫瘤細(xì)胞等，指來(lái)源于原發(fā)腫瘤或其轉(zhuǎn)移灶的腫瘤細(xì)胞或因診療操作進(jìn)入外周血循環(huán)的腫瘤細(xì)胞。

 1.2檢測(cè)方法

 CTCs檢測(cè)包括富集和分析兩個(gè)步驟。富集技術(shù)是利用物理化方法將外周血中為數(shù)極少(1/109)腫瘤細(xì)胞特異性濃集；分析技術(shù)則依靠腫瘤細(xì)胞表面上存在的腫瘤特異性或器官特異性標(biāo)記或依據(jù)其形態(tài)學(xué)特征與其他細(xì)胞作鑒別，并確定其分 子特征。 目前檢測(cè)CTCs的方法包括特殊濾器過(guò)濾、基于細(xì)胞密度進(jìn)行分離的技術(shù)、RT-PCR檢測(cè)技術(shù)、流式熒光檢測(cè)儀_-UMINEX100TM[6]、MagSweeper免疫磁珠篩選技術(shù)、熒光激活細(xì)胞分選器(Fluorescence activated cell sorter,FACS)、納米飛紙技術(shù)、MAINTRAC平臺(tái)、CTC-芯片[7]和CellSearchTM[8]系統(tǒng)等。CellSearchTM是目前得到FDA批準(zhǔn)的對(duì)CTCs進(jìn)行檢測(cè)的平臺(tái)。

 1.3臨床應(yīng)用
Sastrev等[9]、Danila等[10]研究報(bào)道循環(huán)腫瘤細(xì)胞的增加會(huì)降低實(shí)體瘤患者總體生存期；Bluemke等[11]研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤細(xì)胞與腎癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)聯(lián)。Bidard等[12]報(bào)道稱循環(huán)腫瘤細(xì)胞基線水平可作為轉(zhuǎn)移性乳腺癌抗血管生成治療藥效方面的生物學(xué)標(biāo)志。循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)具有極高臨床
價(jià)值，為判斷癌癥早期轉(zhuǎn)移、預(yù)后以及制定個(gè)體化治療方案提供新的依據(jù)。

 2循環(huán)腫瘤細(xì)胞在泌尿系腫瘤的研究現(xiàn)狀

 2.1前列腺癌
在歐美，前列腺癌在男性惡性腫瘤中為常見，病死率居各種癌癥第2位。我國(guó)前列腺癌發(fā)病率明顯低于西方國(guó)家，但近年來(lái)呈迅速上升趨勢(shì)。外周血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)對(duì)于判斷前列腺癌患者預(yù)后分組、內(nèi)分泌治療敏感性和預(yù)后具有重要意義。 CTCs與前列腺癌分期分級(jí)關(guān)聯(lián)尚有爭(zhēng)議。在局限性前列腺癌患者中，CTCs數(shù)量與腫瘤大小、病例分期以及Gleason評(píng)分不相關(guān)[13]。Schwarzenbach等[14]分別研究了69名Mo期和12名M．期前列腺癌患者，發(fā)現(xiàn)71.0% Mo期、92%M,期患者外周血內(nèi)分別檢測(cè)出1～40個(gè)CTCs，且CTCs的出現(xiàn)與腫瘤分期(P<0.03)及增高的Gleason分?jǐn)?shù)（P=0.04）具有相關(guān)性，提示循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)可協(xié)同PSA指導(dǎo)前列腺癌患者預(yù)后分期分組
。 CTCs作為內(nèi)分泌治療敏感性的預(yù)測(cè)因子，有助于制定佳治療方案。Okegawa等[15]學(xué)者對(duì)80例接受內(nèi)分泌治療的轉(zhuǎn)移性前列腺癌患者的CTCs進(jìn)行了研究，44例(55%)檢出大于或等于5個(gè)（7.5 ml外周血），其內(nèi)分泌治療中位有效期為17個(gè)月；小于5個(gè)的患者的內(nèi)分泌治療中位有效 期大于32個(gè)月（P=0.007）。Goldkorn等[16]運(yùn)用S0421（多西他賽聯(lián)合強(qiáng)的松）治療激素抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的過(guò)程中，上升的CTC與總體生存期( overall survival，OS)呈現(xiàn)明顯負(fù)相關(guān)（HR=2.55），這為優(yōu)化治療方案提供了早期依據(jù)。 眾多學(xué)者對(duì)發(fā)生轉(zhuǎn)移的前列腺癌患者進(jìn)行多變量分析，證實(shí)CTCs對(duì)判斷前列腺癌患者預(yù)后生存具有重要價(jià)值，其可以作為判斷患者()S[16]以及無(wú)進(jìn)展生存期(Progress-free survival，PFS)[17]的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。Thalgott等[18]研究人員證實(shí)，腫瘤轉(zhuǎn)移患者外周血中檢測(cè)CTCs數(shù)量不小于3個(gè)（7.5 ml外周血）時(shí)，其OS（中位生存期178天）較小于3個(gè)（中位生存期未明確）的患者明顯縮短。Goldkorn等[16]對(duì)已轉(zhuǎn)移的mCRPC患者應(yīng)用S0421進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)，運(yùn)用Cell SearchTM系統(tǒng)檢測(cè)化療前CTCs的數(shù)量，確定其與OS之間的關(guān)聯(lián)，結(jié)果顯示外周血中CTCs小于5個(gè)（7.5 ml外周血）的患者（中位生存期26個(gè)月）較多于5個(gè)的患者（中位生存期13個(gè)月）OS明顯增加(HR-2．74)，證明CTCs基線水平可以預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移性前列腺癌患者總體生存期和無(wú)進(jìn)展生存期。

 2.2膀胱癌膀胱癌

在泌尿系統(tǒng)中為常見，多為移行細(xì)胞癌。其惡性度較高，治療復(fù)雜，復(fù)發(fā)率高，目前尚無(wú)可靠血清標(biāo)志物以監(jiān)測(cè)膀胱癌的進(jìn)展。 研究表明，CTCs的檢測(cè)可判斷膀胱癌患者的臨床分期、預(yù)后以及指導(dǎo)制定化療方案，但在病理分期方面仍存在爭(zhēng)議。Gazzaniga等[19]運(yùn)用CellSearchrM系統(tǒng)對(duì)44例非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌(NMIBC)患者血液樣本進(jìn)行分析，8/44 (18%)例患者檢出CTCs（中位數(shù)1.5個(gè)、1～3個(gè)），其中7/8 (87.5%)例患者在兩年內(nèi)出現(xiàn)原位復(fù)發(fā)，CTCs陰性組的36例患者中發(fā)生原位復(fù)發(fā)率則為36%（13例）：陽(yáng)性組復(fù)發(fā)時(shí)間（中位數(shù)6.5個(gè)月）較陰性組（中位數(shù)21.7個(gè)月）顯著縮短(P<O. 001)；并且CTC陽(yáng)性組中復(fù)發(fā)者均發(fā)生了肌層浸潤(rùn)。該研究中，8/26( 31%)例T1期腫瘤患者血液中檢出CTCs，而其余18例Ta期患者中未檢出CTCs，差異顯著 (P=O, 0275)。Rink[20]對(duì)50例局限性膀胱癌患者術(shù)前外周血中CTCs進(jìn)行檢測(cè)，1