尿TGFβ1、Ⅳ型膠原與早期糖尿病腎損害及科素亞的干預(yù)作用

作者：陳寬林　　作者單位：江蘇職工醫(yī)科大學(xué)內(nèi)/兒科教研室，江蘇南京 210029

　　【摘要】 目的 探討尿中轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)、Ⅳ型膠原(T4C)與早期糖尿病腎病(EDN)腎臟損害關(guān)系及科素亞的干預(yù)作用。方法 檢測113例2型糖尿病患者(EDN組68例、未合并腎病組T2DM組45例)尿中TGFβ1、T4C、尿白蛋白排泄率(UAER)，比較EDN與T2DM組TGFβ1、T4C水平差異，并就EDN組科素亞干預(yù)前后TGFβ1、T4C、UAER水平差異及三者之間相關(guān)性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 EDN組TGFβ1、T4C水平明顯高于T2DM組;科素亞干預(yù)前后分析表明，EDN組尿中TGFβ1、T4C與UAER之間具有較高正相關(guān)性(P均<0.01)，科素亞干預(yù)后三者水平有降低，但差異無顯著意義(P均>0.05)。結(jié)論 EDN組尿中TGFβ1、T4CEDN腎臟損害有較密切關(guān)系，尿中TGFβ1、T4C水平可以作為EDN診斷和監(jiān)控指標(biāo);科素亞對(duì)TGFβ1、T4C、UAER有一定干預(yù)作用。

　　【關(guān)鍵詞】 轉(zhuǎn)化生長因子β1,Ⅳ型膠原;尿白蛋白排泄率;糖尿病腎病

　　【Abstract】 ob[x]jective To study the correlation between urinary transforming growth factor beta1(TGFβ1),type Ⅳ collagen(T4C) and the lesion of early diabetic nephropathy(EDN),and to research the intervene effect of Cozaar along with it.Methods 113 diabetic cases were divided into END group(68 cases) and T2DM group(45 cases) . The levels of urinary TGFβ1,T4C and urinanry albumin excreation rate(UAER) were detected and compared the TGFβ1、T4C level in the two groups.And detected the TGFβ1、T4C、 UAER level changing before and after applied cozaar in EDN group.Results The TGFβ1、T4C level in END group were obviously higher than those in T2DM group .Statistic analysis indicating the high positively correlation between urinary TGFβ1, T4C and UAER,and there urinary level were decreased after intervene of cozaar.Conclusion the urinary TGFβ1, T4C are positively correlated with the lesion of EDN;and they can be taken as surveying indicators of EDN.Cozaar can affect the urinary TGFβ1、T4C、UAER level.

　　【Key words】 transforming growth factor beta1;type Ⅳ collagen;albumin excreation rate;diabetic nephropathy

　　本研究先前的實(shí)驗(yàn)和相關(guān)結(jié)果表明[1，2]，糖尿病腎病(DN)患者血清轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)水平升高;Ⅳ型膠原(T4C)作為腎小球系膜細(xì)胞外基質(zhì)重要成分，尿和血中水平反應(yīng)了DN時(shí)腎臟損害程度[3]。為探討尿中TGFβ1、T4C與早期糖尿病腎病(EDN)腎臟損害的關(guān)系及科素亞的干預(yù)作用，我們檢測了113例2型糖尿病(T2DM)(EDN組68例、T2DM未合并腎病組45例)患者尿中TGFβ1、T4C、白蛋白排泄率(UAER)水平，并就相關(guān)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

　　對(duì)象與方法

　　1.對(duì)象

　　EDN組68例，男29例，女39例，年齡在38～82歲之間，平均年齡63±11歲，診斷病程在11～26年之間，平均18±9年。T2DM45例，男21例，女24例，年齡在37～71歲之間，平均年齡60±14歲，診斷病程5～16年之間，平均12±5年。所有病例無合并高血壓、腎功能不全等疾病。T2DM診斷符合1999年WHO標(biāo)準(zhǔn)[4]。EDN入選標(biāo)準(zhǔn)為6個(gè)月內(nèi)連續(xù)3次檢測UAER，平均水平為20～200 μg•min-1，并排除其他原因引起的白蛋白尿。對(duì)合并有腎功能不全、急慢性活動(dòng)性肺結(jié)核、急慢性肝炎、肝硬化、高血脂、各種腫瘤、糖尿病急性并發(fā)癥、妊娠、其他部位非特異性炎癥者予以剔除。所有EDN患者給予科素亞50mg口服每日一次，連續(xù)2周，同時(shí)檢測血壓變化(如出現(xiàn)低血壓立即予以停止)。所有患者留取24小時(shí)尿液(EDN組留取干預(yù)前后24小時(shí)尿液)，混勻計(jì)量，不加防腐劑，取適量-40℃保存待檢。

　　2.方法

　　TGFβ1，T4C：酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，以上方法均做復(fù)孔檢測，550Bio Rad酶標(biāo)儀450 nm讀取數(shù)值，自動(dòng)分析軟件分析結(jié)果，取各標(biāo)本水平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。UAER：散射比濁法。

　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果以-±s表示，T2DM與EDN組尿中TGFβ1，T4C水平進(jìn)行非配對(duì)t檢驗(yàn)(先行方差齊性F檢驗(yàn)確定t或t'檢驗(yàn));EDN組科素亞干預(yù)前后尿TGFβ1，T4C水平與UAER作相關(guān)性r分析;EDN組干預(yù)前后尿TGFβ1，T4C，UAER水平差異進(jìn)行自身對(duì)照t檢驗(yàn)。TGFβ1ELISA試劑盒批內(nèi)差異≤4.5%，批間差異≤6.8%;T4C ELISA試劑盒批內(nèi)差異≤5.8%，批間差異≤7.6%。所有結(jié)果由SAS6.12分析軟件分析。

　　結(jié) 果

　　相應(yīng)檢驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表1。EDN組中TGFβ1，T4C明顯高于T2DM組，兩者有顯著性差異(P均<0.01);科素亞干預(yù)前后EDN組尿TGFβ1，T4C與UAER相關(guān)系數(shù)r分別為0.607、0.672(P均<0.01)和0.587、0.686(P均<0.01);科素亞干預(yù)后EDN組TGFβ1，T4C、UAER水平較干預(yù)前有所降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。表1 各組觀察指標(biāo)檢測結(jié)果比較(略)注：※與T2DM組比較，P均<0.01;△與科素亞干預(yù)前比較，P均>0.05

　　討 論

　　EDN臨床診斷比較困難，目前工人的UAER水平影響因素較多[3]，而近年來人們對(duì)TGFβ1在DN中的作用有了越來越多的認(rèn)識(shí)。研究發(fā)現(xiàn)，在單純DMEDN時(shí)患者血和尿中的TGFβ1即升高[1，2]，有學(xué)者研究認(rèn)為，其在尿中水平可以作為DN的早期診斷與監(jiān)控指標(biāo)[2，5]。T4C是細(xì)胞外基質(zhì)的重要成分，DM尤其是DN時(shí)腎小球系膜細(xì)胞和腎小管間質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)中T4C的含量明顯增加，血和尿中的水平也隨之增加，且與腎臟損害程度有關(guān)[6]。相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，DM時(shí)多種因素可能導(dǎo)致TGFβ1、T4C升高[7]，并且TGFβ1的表達(dá)對(duì)腎小球細(xì)胞外基質(zhì)中T4C的量有直接和重要影響作用。血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)可以誘導(dǎo)腎小球系膜細(xì)胞和腎小管間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)TGFβ1mRNA的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄，其結(jié)果導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)T4C增加，而導(dǎo)致腎小球和腎小管的病理損害。科素亞作為AngⅡ的受體拮抗劑，通過競爭抑制AngⅡ受體，從而在一定程度上抑制了AngⅡ的上述生物學(xué)作用。

　　本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，EDN組尿中TGFβ1，T4C水平明顯高于T2DM組，與UAER具有高度相關(guān)性，說明其水平變化與EDN腎臟損害程度成正相關(guān)。TGFβ1，T4C在尿中的水平變化受影響因素相對(duì)較少，因此，可能更好地反映了腎臟的損害程度，并可以作為EDN的監(jiān)控指標(biāo)，但對(duì)其在EDN的診斷價(jià)值有待進(jìn)一步研究及探討?？扑貋喭ㄟ^競爭抑制AngⅡ受體，從而降低尿中TGFβ1，T4C和UAER水平，本組干預(yù)后尿中TGFβ1，T4C和UAER水平雖有降低，但差異無顯著意義，因而其長期作用及臨床意義有待進(jìn)一步探討。